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为寻找特异性强、敏感性高,且操作简便、费用低廉,并能大规模应用于现场的日本血吸虫病血清学诊断方法,本试验以疫区黄牛为研究对象,应用环卵沉淀试验(COPT)、血清法间接血凝试验(sIHA)和血纸法间接血凝试验(bpIHA)、胶乳凝集试验(PAPS)、三联斑点酶联免疫吸附试验(三联Dot-ELISA)五种血清学诊断方法与粪检方法检测闩本血吸虫病;并以三粪九检结果作为标准对照,对五种血清学检测效果进行评价,并对其费用结果进行比较。研究结果如下: 1 粪检结果 对长期敞放湖洲的148头黄牛采粪并编号,将所采粪样用尼龙筛淘洗棉析孵化法进行粪检。一粪三检检出阳性黄牛83头,阳性率为56.1%(83/148);二粪六检检出阳性黄牛102头,阳性率为68.9%(102/148);三粪九检检出阳性黄牛110头,阳性率为74.3%(110/148)。结果表明:1血吸虫病依然严重威胁着疫区畜牧业的生产和发展;2在基层普遍采用的一粪三检存在较大的漏检率,其检出率仅为三粪九检结果(阳性110头)的75.5%(83/110),基层提倡采用的二粪六检的阳性检出率相对提高,但也存在一定的漏检,其检出率为三粪九检结果的92.7%(102/110)。3漏检率与感染强度有关,在粪检总共漏检的27头黄牛中,其中“+”20头(74.1%),“++”5头(18.5%),“+++”1头(3.7%),“++++”1头(3.7%),因此在检查过程中,一定要严格按操作程序、认真、仔细地进行检查。 2 五种血清学检测方法的检测结果 对已编号并采粪的148头黄牛进行采血及制备血纸,对所采血样分离的血清分别进行COPT、sIHA、PAPS、三联Dot-ELISA检测以及对所制备的血纸进行bpIHA检测。COPT检出阳性黄牛101头,检出率为68.2%(101/148);与三粪九检的阳性符合率为91.8%;阳性强度为:“+”22头, “++”40头,“+++” 19头,“++++” 20头。sIHA检出阳性黄牛 113 头,检出率 为76.*%(口3门48);与三粪九检的阳性符合率为97.3%:阳性强度为:“+”二O头, “十十” 57头,“十++” 18头,“十++十” 18头口 bpIHA检出阳性黄牛 94头,检出率 为63.5%(94/148);与三粪九检的阳性符合率为76.4%;阳性强度为:“+”62头, “十+” 20头,“十十+” 6头,“十十++” 6头口 PAPS检出阳性黄牛 103 头,检出率为 Q t 69石%(103/148);与三粪九检的阳性符合率为 85.5%;阳性强度为:“+” 54头, ‘占十十” 24头,包吕++十号’16头,‘吕十+十十’罗 9头o三联 DotELISA检出阳性黄牛互 4头雳 检出率为乃刀%(114川轮):与三粪九检的阳性符合率为98.二%阳性强度为:“+” 46头,“++”38头,“+++” 14头,“++。+” 16头。结果表明:血清学方法COPT、 SIHA、三联DOt七LISA与三粪九检的阳性符合率高于血清学方法PAPS和bpIHA。 3粪检与五种血清学方法的试验结果的评价 以三粪九检阳性作为标准对照, 将三粪九检与五种血清学方法检测结果分别整理成四配对表格形式,进一步评价 五种血清学方法的实用价值,得出五种血清学检测法的效果监测指标:敏感性(sc)、 特异性kp\假阳性率、假阴性率、阳性预测值、阴性预测值、YOuden指数。结 果表明:血清学方法COPT、SIHA、bpIHA、PAPS、三联DNELISA的敏感性分 别为引.8%。97.3%、76.4%、85.5%、98二%,特异性分别为 97.4%、84.2%、73石%、0 76.3%、84二%,假阳性率分另IJ为 2.6%、15.7%、26.4%、23.7%、15.8%,假阴性率 分别为8.2%、2.7%、23.6%、14.5%、1.8%,阳性预测值分别为99.0%、94.7%、 89.4%、gi.3%、94.7%,阴性预坝u值分另IJ为 80.4%、gi.4%、sl.9%、64.4%、94.l%, Youden指数分另IJ为 89.2、sl.5、50.0、61.8、83.4。从效果监测指标可以得出,血 清学万法COPT、SIHA、三联DOtELISA较bpIHA、PAPS、的诊断效果佳。 4费用分析 通过对粪检与五种血清学方法检测费用的分析,三粪九检1 头 牛需IO刁25兀,P*陀、三联D。卜oISA、sl*Al头牛需1.82O元,*0盯1头牛需 1.830元,bpIHA头牛只需 1.325元。粪检法所需的费用是血清学方法PAPS、三 联 DOt-ELISA、SIHA 5.53倍,是 bpIHA 7*4倍。 5 综合分析 通过粪检与五种血清学方法的检测效果、检测费用的评价与分 析,血清学方法COPT、SIHA、三联D。t-ELISA,与三粪九检结果符合率高,具有灵 敏度高、特异性好、简捷方便、费用低等特点,适用于疫区家畜血吸虫病的诊断、普 查,是比较理想的现场检测方法,值得推广。血清学方法bpIHA和 PAPS检测血吸虫 病,尽管方法简便、费用低廉,但其灵敏度、特异性与三