【摘 要】
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山羊IL-2基因克隆入pBV220质粒后在大肠杆菌中表达，实验测定其表达产物的生物学活性，同时研究了重组IL-2对不同种属动物淋巴细胞的交叉反应性。 建立了检测山羊白细胞介素-2
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山羊IL-2基因克隆入pBV220质粒后在大肠杆菌中表达，实验测定其表达产物的生物学活性，同时研究了重组IL-2对不同种属动物淋巴细胞的交叉反应性。 建立了检测山羊白细胞介素-2的MTT比色法，认为：3μg/mL的Con A浓度刺激，经过36小时活化所得的应答细胞活性最好；MTT用量以20μL（50μg/μL），MTT作用时间以4小时为最佳；IL-2与活化细胞的作用时间以18小时最适。 根据GenBank上发表的山羊IL-2序列，设计了一对引物。用RT-PCR方法，从外周血淋巴细胞的总RNA中扩增出山羊IL-2基因。琼脂糖电泳显示扩增片段大约为500bp。片段克隆入表达质粒pBV220，用酶切鉴定。测序结果显示，克隆的山羊IL-2基因与Genbank上发表的序列一致。该序列与绵羊和牛的IL-2基因序列同源性最大，在96％以上；氨基酸和抗原性比较分析认为，山羊IL-2与绵羊及牛的IL-2在这两方面有较大的同源性。 山羊IL-2基因在细菌中表达，分子量约16KD；超声波裂解初步分离后，表达产物主要分布在细胞裂解液的上清，包涵体中较少。所获重组山羊IL-2对山羊、水牛淋巴细胞也有明显的生物学活性，对猪淋巴细胞作用不明显。
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