论文部分内容阅读
目的:
分析大肠癌组织中HIPK2表达与肿瘤临床病理学的关系，研究肉苁蓉活性成分麦角甾苷对人大肠癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长及对人大肠癌细胞增殖、凋亡的影响，探讨麦角甾苷调控HIPK2-P53信号通路对人大肠癌细胞凋亡的作用机理，为临床上使用扶正中药抗大肠癌复发转移提供理论基础和实验依据。
方法:
收集人大肠癌组织及正常肠组织标本，免疫组化法检测HIPK2表达水平，分析HIPK2表达与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、分期、淋巴结转移及浸润深度的相关性。建立大肠癌裸鼠移植瘤模型，分为正常组、麦角甾苷低、中、高剂量组和5-FU组，检测裸鼠瘤体体积、瘤重、瘤组织中HIPK2、P53、Bax和Bcl-2的表达。采用CCK-8法检测麦角甾苷对人大肠癌细胞增殖的作用，流式细胞术检测对细胞凋亡的影响。WesternBlot检测麦角甾苷对人大肠癌细胞中HIPK2、P53、p-P53、Bax及Bcl-2的表达，及抑制P53后对细胞凋亡率及HIPK2-P53信号通路及凋亡相关蛋白的影响。
结果:
大肠癌组织中HIPK2表达与肿瘤大小、分化及淋巴结数目等无关，而与Dukes分期和浸润深度密切相关(P＜0.05)。肉苁蓉活性成分麦角甾苷低、中、高剂量对裸鼠瘤重抑制率分别为42.79％、53.90％、60.99％，能够增加裸鼠大肠癌组织中HIPK2、P53、Bax的表达，抑制Bcl-2表达;25μM、50μM和100μM麦角甾苷对HCT-116、HT-29细胞48h的凋亡率分别为10.83±1.28、11.25±1.54、20.19±2.87和18.92±6.12、21.57±4.05、25.14±6.73。麦角甾苷能够上调大肠癌细胞中HIPK2、P53、p-P53及Bax蛋白表达，下调Bcl-2蛋白表达;而抑制P53后，则可明显抑制麦角甾苷诱导凋亡的作用，降低细胞中P53、p-P53及Bax的表达，上调Bcl-2的表达，而对HIPK2表达无影响。
结论:
大肠癌组织中HIPK2表达与Dukes分期和浸润深度有关。肉苁蓉活性成分麦角甾苷能够抑制裸鼠移植瘤模型肿瘤生长及大肠癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，并通过上调HIPK2表达，特异性磷酸化P53Ser46位点，进而调控凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达而促进肠癌细胞凋亡。