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目的:研究黄芩苷对兔tenon氏囊成纤维细胞增殖及TGF-β1表达的影响,初步探讨黄芩苷对抗青光眼术后滤过泡瘢痕化的治疗作用。
方法:以体外培养的兔tenon氏囊成纤维细胞为实验对象,分别加入不同浓度(15,30,45,60μg/ml)黄芩苷培养24,48,72 h后采用MTT法检测药物对细胞的抑制率;采用流式细胞术及半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测30μg/ml黄芩苷作用48h后成纤维细胞生长周期情况及TGF-β1mRNA的变化;
结果:⑴体外培养的兔tenon氏囊成纤维细胞三天即从组织块边缘游离出,14天长满融合呈漩涡状走形;⑵MTT法显示含不同浓度(15,30,45,60μg/ml)黄芩苷的培养液作用于体外培养的兔tenon氏囊成纤维细胞24,48,72 h后,细胞的生长明显受到抑制,且有时间-剂量依赖关系,即随着时间和浓度的增加对细胞的抑制作用明显增强;⑶流式细胞术显示黄芩苷能够将成纤维细胞的细胞周期阻滞在G1期,进入S期的细胞由35.1733±1.8441(%)减少到22.1333±0.6901(%),而S期是细胞分裂的重要时期,黄芩苷可以明显的阻滞成纤维细胞的有丝分裂进程,从而抑制其增殖;⑷RT-PCR显示黄芩苷浓度为30μg/ml的培养液作用于成纤维细胞48h后黄芩苷组TGF-β1/GAPDH相对灰度值为1.0162±0.0028,对照组为1.1502±0.0285,DMSO组为1.1241±0.0163,黄芩苷组TGF-β1的mRNA的含量明显低于对照组。
结论:①黄芩苷可抑制体外培养的兔Tenon氏囊成纤维细胞增殖,且有时间.剂量依赖关系;②黄芩苷能够显著改变成纤维细胞周期的分布,减缓其有丝分裂的进程,从而抑制其过度增殖;③经黄芩苷作用后成纤维细胞内TGF-β1的表达明显下降,提示其抑增殖的作用与下调TGF-β1的表达有关。
方法:以体外培养的兔tenon氏囊成纤维细胞为实验对象,分别加入不同浓度(15,30,45,60μg/ml)黄芩苷培养24,48,72 h后采用MTT法检测药物对细胞的抑制率;采用流式细胞术及半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测30μg/ml黄芩苷作用48h后成纤维细胞生长周期情况及TGF-β1mRNA的变化;
结果:⑴体外培养的兔tenon氏囊成纤维细胞三天即从组织块边缘游离出,14天长满融合呈漩涡状走形;⑵MTT法显示含不同浓度(15,30,45,60μg/ml)黄芩苷的培养液作用于体外培养的兔tenon氏囊成纤维细胞24,48,72 h后,细胞的生长明显受到抑制,且有时间-剂量依赖关系,即随着时间和浓度的增加对细胞的抑制作用明显增强;⑶流式细胞术显示黄芩苷能够将成纤维细胞的细胞周期阻滞在G1期,进入S期的细胞由35.1733±1.8441(%)减少到22.1333±0.6901(%),而S期是细胞分裂的重要时期,黄芩苷可以明显的阻滞成纤维细胞的有丝分裂进程,从而抑制其增殖;⑷RT-PCR显示黄芩苷浓度为30μg/ml的培养液作用于成纤维细胞48h后黄芩苷组TGF-β1/GAPDH相对灰度值为1.0162±0.0028,对照组为1.1502±0.0285,DMSO组为1.1241±0.0163,黄芩苷组TGF-β1的mRNA的含量明显低于对照组。
结论:①黄芩苷可抑制体外培养的兔Tenon氏囊成纤维细胞增殖,且有时间.剂量依赖关系;②黄芩苷能够显著改变成纤维细胞周期的分布,减缓其有丝分裂的进程,从而抑制其过度增殖;③经黄芩苷作用后成纤维细胞内TGF-β1的表达明显下降,提示其抑增殖的作用与下调TGF-β1的表达有关。