“通调针法”电针对MGH大鼠HPI轴相关激素及下丘脑垂体TRHmRNA和TSHmRNA表达的影响

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目的:
  本研究分析乳腺增生与“下丘脑-垂体-甲状腺轴”的关联性,进一步探究电针治疗乳腺增生的可能性机制,为临床治疗提供依据。
  方法:
  选用36只健康雌性未孕SD大鼠,适应性喂养1周后,运用随机数字表法分为空白组(A组)、模型组(B组)和电针组(C组)。开始造模,空白组在大鼠下肢大腿外侧肌注0.9%氯化钠溶液(0.5mg/kg),接连30天;模型组和电针组在大鼠下肢大腿外侧肌注苯甲酸雌二醇联合黄体酮注射液,前25天肌注苯甲酸雌二醇(0.5mg/kg),后5天肌注黄体酮(5mg/kg),接连30天。造模结束后,用随机数字表法在3组大鼠中各随机抽取1只大鼠,取其左侧第2只乳腺组织进行HE染色,观察大鼠乳腺组织形态学变化;用精密游标卡尺测量各组大鼠左侧第2只乳头高度及直径。确认造模成功后,对3组大鼠在每日9:00-11:00时进行治疗,空白组和模型组每日抓拿、固定但不针刺;电针组大鼠固定于施术台上,运用国医大师郭诚杰教授创立的“通调针法”电针干预,根据《实验针灸学》结合动物解剖学的方法取穴,穴位消毒后以0.35x13mm的毫针刺入,连接G6805-A型电针仪,刺激参数选用连续波,频率2Hz,干预时间20min,每天1次,连续干预5天为1个疗程,2个疗程之间间隔2天,共干预4个疗程。实验过程中每天称量大鼠体重并记录,干预结束后,观察各组大鼠一般情况、测量各组大鼠左侧第2只乳头高度及直径,再取各组大鼠乳腺组织,在电镜下观察乳腺组织形态学变化;采集大鼠血清及下丘脑、垂体组织;采用ELISA法,检测血清T3、T4、TSH的含量;PCR法检测下丘脑组织TRHmRNA和垂体组织TSHmRNA的表达变化。探讨“通调针法”电针对乳腺增生模型大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响。
  结果:
  1、大鼠一般情况、体重结果:
  本实验结果显示,造模后模型组大鼠较空白组比较,其活动度、进食情况、反应性、习性变化、背毛情况等均较差,体重增长明显减慢;经过“通调针法”电针干预后,电针组大鼠的一般情况(进食、活动度、习性、被毛情况)均显著改善,体重增长明显加快。
  2、大鼠造模与干预情况:
  造模后,各模型组大鼠较空白组比较,其乳头高度及直径均显著增大(<0.01),HE染色后用光镜观测其乳腺组织形态结构,大鼠乳腺导管扩张、小叶增生、上皮细胞排列不齐、脂肪及结缔组织数目减少;经过“通调针法”电针干预后,电针组大鼠的乳腺组织形态结构对比模型组显著改善,乳头高度及直径显著缩小(<0.01),并接近空白组大鼠。
  3、血清T3、T4、TSH含量及组织TSHmRNA和TRHmRNA的表达:
  ①与空白组相比,模型组大鼠血清T3、T4含量降低,有显著差异(<0.01),说明模型组大鼠血清T3、T4含量值低于空白组;与模型组相比,电针组大鼠血清T3、T4含量升高,有显著差异(<0.01),说明“通调针法”电针干预后能明显改善MGH大鼠血清T3、T4含量的值,且基本接近正常水平。
  ②与空白组相比,模型组大鼠血清TSH含量降低,有明显差异(<0.05),说明模型组大鼠血清TSH含量值低于空白组;与模型组相比,电针组大鼠血清TSH含量升高,有明显差异(<0.05),说明“通调针法”电针干预后能改善MGH大鼠血清TSH含量的值,且基本接近正常水平。
  ③与空白组比较,模型组大鼠TSHmRNA、TRHmRNA显著性变化(<0.01),表达量均下降;与模型组比较,电针组大鼠TSHmRNA、TRHmRNA有显著差异(<0.01),表达量均升高。
  结论:
  1.在雌孕激素紊乱基础上,HPT轴血清激素水平及垂体、下丘脑组织的TSHmRNA和TRHmRNA表达量均下调,导致HPT轴功能紊乱是引起乳腺增生的可能途径;
  2.“通调针法”电针干预MGH模型大鼠效果良好且确切;
  3.“通调针法”电针治疗乳腺增生的可能性机制是通过调节HPT轴分泌功能来促进增生组织复原以发挥其治疗作用。
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