【摘 要】
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带有PreS区的重组乙肝表面抗原有望成为新一代更高效的乙肝疫苗.该文研究了带PreS免疫决定簇的得组乙肝表面抗原SS1,S1S和S2S在啤酒酵母和毕赤酵母表达系统中的表达.结果表明
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学
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带有PreS区的重组乙肝表面抗原有望成为新一代更高效的乙肝疫苗.该文研究了带PreS免疫决定簇的得组乙肝表面抗原SS1,S1S和S2S在啤酒酵母和毕赤酵母表达系统中的表达.结果表明,在Pichia系统中,表达水平可达20-70mg/L,表达产物形成同时具有S及相应的PreS抗原性的颗粒.利用单抗亲和层析,对Pichia表达的SS1融合蛋白进行了纯化,一步纯化 即得到纯度为95i的产物.性质鉴定表明,纯化的SS1融合蛋白可以同时具有S和PreS1抗原性的颗粒.免疫小鼠的结果表明,该纯化蛋白可以同时激起很强的抗S和抗PreS1的抗体反应.CpG免疫佐剂的使用可促使免疫小鼠产生针对S和PreS1的Th1类免疫反应.这些结果表明Pichia表达的SS1融合蛋白有可能发展成为一种廉价而高效的新疫苗.PreS1(21-47)是HBV的肝细胞受体结合蛋白,对于研究HBV的受体有重大意义.采用cDNA噬菌体展示的方法,以SS1融合蛋白为靶蛋白,从人肝脏cDNA文库中筛选得到一段cDNA.该cDNA编码的蛋白片段,能特异结合PreS1(21-47),命名为S1BP[CTD].将该cDNA与硫氧还蛋白融合表达,利用这一融合蛋白 ,通过免疫共沉淀和Thio-pulldown证实了S1BP[CTD]特异结合PreS1(21-47)的能力.更重要的是,这一融合蛋白还可以俘获HBV病毒颗粒.抗PreS1抗体可以阻断这种结合,而抗S抗体 则未能表现出阻断能力.
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