【摘 要】
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卵母细胞发育质量的研究具有重要的实际应用价值。目前常规的质量评估手段主要从形态学角度和生化分析角度展开。众所周知生物组织的结构与成分通常随其病理状态而变化,同时也伴随着其内部光学性质的改变,这将影响到光在生物组织内的强度分布及反射与穿透能力等。鉴于此,本论文拟通过检测卵母细胞的光学性质来研究其发育质量,具体的,本论文主要研究了卵母细胞的偏振特性及光谱特性与其发育质量之间的关联。本论文基于Muell
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卵母细胞发育质量的研究具有重要的实际应用价值。目前常规的质量评估手段主要从形态学角度和生化分析角度展开。众所周知生物组织的结构与成分通常随其病理状态而变化,同时也伴随着其内部光学性质的改变,这将影响到光在生物组织内的强度分布及反射与穿透能力等。鉴于此,本论文拟通过检测卵母细胞的光学性质来研究其发育质量,具体的,本论文主要研究了卵母细胞的偏振特性及光谱特性与其发育质量之间的关联。本论文基于Mueller矩阵成像技术研究卵母细胞的偏振特性与其发育质量之间的关联。首先以GV期卵母细胞为例,详细地介绍了偏振特性研究的方法体系。随后将该方法应用到不同发育阶段（GV期（未成熟期）、GVBD期（发育期）和MII期（成熟期））和不同成熟质量卵母细胞（新鲜成熟卵母细胞和排卵后老化5h、10h、12h、20h、24h卵母细胞）的偏振特性研究中,结果表明二向色性参数随发育逐渐增加,线性相位延迟参数随发育逐渐减小,且线性相位延迟参数随成熟质量的下降而增加。可见偏振特性检测在评估卵母细胞质量方面存在可行性,尤其是线性相位延迟参数在反映卵母细胞的质量方面具有较高的敏感性。此外我们还比较了活的和固定的卵母细胞的偏振特性,发现用4%多聚甲醛对卵母细胞固定30min并不影响其偏振特性。本论文研究卵母细胞的光谱特性与其发育质量之间的关联时,首先利用紫外—可见光谱技术在190nm～1100nm的波长范围内测量了不同发育阶段（GV期和MII期）和不同成熟质量卵母细胞（新鲜成熟卵母细胞和排卵后老化24h卵母细胞）的紫外—可见光谱,发现与成熟卵母细胞（MII期）的紫外—可见光谱相比,未成熟（GV期）与老化卵母细胞的光谱均出现了部分峰位的缺失和增加。然后本文利用多光谱成像技术在400nm～700nm的可见光谱范围内无损伤且逐个地测量了GV期、MII期和排卵后老化卵母细胞的透射光谱。结果表明,同一类型的卵母细胞其各生物结构的光谱曲线无显著差别,可以以一种生物结构的光谱曲线来代表这种卵母细胞的光谱特性。因此我们以卵胞质的透射光谱为代表对不同发育阶段卵母细胞的光谱特性进行了对比分析,发现451nm和467nm处的波峰强度可以区分不同发育阶段的卵母细胞;接着又研究了不同成熟质量卵母细胞的光谱特性,发现425nm、431nm、571nm和669nm的光谱差异可以用来区分不同成熟质量的卵母细胞。本文所建立方法或将在甄别卵母细胞质量方面展现出巨大的可行性,为卵母细胞质量评估工作提供全新的思路。
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