降香提取物促血管新生药效及作用机制的研究

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目的:豆科植物降香檀Dalbergia odorifera T.Chen树干和根的干燥心材在中医临床上常被用于各种缺血性疾病的治疗。本研究在前期基础上采用多种化学分离分析手段,利用Tg(fli-1a: EGFP)y1转基因斑马鱼及人脐静脉内皮细胞模型,对降香促血管新生的有效部位(B3、B3-5及B3-6)进行体内外药理学研究。  方法:在Tg(fli-1a: EGFP)y1转基因斑马鱼体内研究中,本研究观察降香不同部位提取物对正常斑马鱼肠下血管出芽新生的效果;通过q-PCR实验评价降香提取物对VRI诱导的转基因斑马鱼ISVs区域血管损伤的治疗作用;体外研究中,本研究通过MTT实验及划痕实验测试降香提取物诱导人脐静脉细胞增殖、迁移的能力,以及对VRI诱导的内皮细胞损伤是否有具有修复作用;又通过蛋白芯片筛选出降香提取物促血管新生相关的信号通路,利用Western Blot加以验证并完善信号通路的研究。  结果:体内试验中,降香提取物B3、B3-5及B3-6在不同安全浓度下均能显著地促进正常转基因斑马鱼肠下血管的新生出芽;能明显的修复VRI诱导的转基因斑马鱼节间血管损伤。q-PCR实验中VRI模型组可使VEGF相关受体mRNA表达下降,而降香提取物B3、B3-5及B3-6能显著并剂量依赖地提高这些受体的表达;体外实验中,降香提取物B3、B3-6在安全浓度下能显著促进内皮细胞的增殖,B3-6能有效促进内皮细胞迁移,并具一定的剂量依赖性。同时,B3-6还能改善VRI诱导的内皮细胞损伤。此外,Akt信号通路蛋白芯片实验及WesternBlot实验证明了降香提取物B3-6对调控增殖、迁移及存活的PI3K/MAPK信号通路的激活作用。  结论:降香提取物B3、B3-5及B3-6在转基因斑马鱼模型及人脐静脉内皮细胞模型上均有良好的促血管新生和修复血管损伤的效果。其中B3-6效果较强,其机制可能与其调控血管新生相关受体mRNA表达水平、激活PI3K/MAPK等信号通路有关。
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