【摘 要】
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胚胎干细胞体外神经分化被广泛应用于神经发生过程的研究，同时也为神经退行性疾病的细胞替代性治疗创造可能。尽管体外神经干细胞的来源以及胚胎干细胞向体外神经分化的方法有
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胚胎干细胞体外神经分化被广泛应用于神经发生过程的研究，同时也为神经退行性疾病的细胞替代性治疗创造可能。尽管体外神经干细胞的来源以及胚胎干细胞向体外神经分化的方法有很多种，但是获得的大多数神经干细胞都缺乏真正的神经干细胞特性，如具有分化的倾向性、无法产生所有神经谱系的细胞类型或者无法响应图式信号。Elkabetz等从人胚胎干细胞分化得到的玫瑰花环神经干细胞被认为是一种真正意义上的神经干细胞，它能够自我更新并分化得到所有区域的神经细胞。尽管有着巨大的应用前景，但该细胞目前无法实现体外长期维持和扩增，在移植实验中的致瘤风险也限制了其临床应用。上述问题的解决需要对玫瑰花环神经干细胞的自我更新和多潜能性维持的分子机制有更深入的了解。与啮齿类动物相比，猕猴在遗传和生理上与人类更接近，并且长期以来一直被认为是人类疾病和临床治疗研究的理想动物模型。 结合本实验室的猕猴资源，我们首先建立了稳定可靠的猕猴胚胎干细胞神经分化体系。然后利用建立的分化平台，对猕猴胚胎干细胞神经分化过程中4个标志性阶段细胞样本(胚胎干细胞，第一代玫瑰花环神经干细胞，第六代玫瑰花环神经干细胞及胶质样神经干细胞)进行深度测序，获得了神经分化过程中mRNA表达谱和microRNA表达谱数据。通过对这些数据进行生物信息学分析，得到了以下主要结果:1)寻找到了各个标志性阶段细胞的特异标记基因，并通过比较发现这些标记基因在人类相似的神经分化阶段具有保守性;2)发现Hedgehog信号通路可能在猕猴胚胎干细胞分化为第一代玫瑰花环神经干细胞中起重要作用;3)猕猴胚胎干细胞神经分化过程中很多基因存在不同的可变剪切方式;4)寻找到了不同分化阶段的神经干细胞的高表达miRNAs，它们可能对神经分化过程中特定阶段的维持有重要作用。这些结果为进一步深入研究猕猴胚胎干细胞神经分化及玫瑰花环神经干细胞的自我更新机制和独特的分化潜能调控提供了大量的基础数据。
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