论文部分内容阅读
随着环境的改变、气候的变化、城市化进程的加快以及人类活动范围的扩大，新发和再发传染病的爆发不断增多。蚊作为主要的媒介昆虫，种类繁多、分布广泛、生活环境复杂，与人和动物关系密切，嗜血的生活习性使其可能成为许多病毒的储存或中间宿主。此外，我国幅员辽阔、地理环境复杂多样，适合多种蚊虫孳生、病毒繁殖。因此对已知蚊媒病毒的监测以及蚊体内病毒病原谱的调查，为新发和再发传染病的防控及病毒多样性的研究提供了十分重要的数据基础。 本研究根据历年蚊媒病毒流行情况，于2013、2014年夏在湖北省9个市及下属乡镇农村共采集蚊虫样本10，101只，通过冷冻处死和病毒载液保存等措施最大程度保证了蚊虫体内的病毒不被降解。利用本实验室已经建立的黄病毒属病毒通用RT-PCR检测方法对其进行检测，检测结果均为阴性。结合采集的地理位置、生态环境，可认为湖北省蚊虫传播黄病毒的风险较低。 另外，为了探究蚊虫中的病毒组成，将2013年在潜江、孝感采集的1，213只蚊虫按照蚊种分成3组，利用454 GS FLX系统进行了病毒宏基因组测序分析。本次测序共获得92，304条reads，其中39％为病毒序列，包括了3.6％的脊椎动物病毒、88％的昆虫病毒、0.8％的植物病毒、1.87％的噬菌体、0.03％的真菌病毒以及0.02％未鉴定的病毒序列，说明蚊虫中病毒丰度高、种类丰富多样。经进一步数据分析和实验验证，在浓核病毒亚科和双顺反子病毒科中鉴定出2株新病毒，还首次在我国蚊虫中发现指环病毒科的猪细环病毒，细小病毒亚科的猪细小病毒和弹状病毒科的三带喙库蚊弹状病毒。此外，依据病毒宏基因组的序列信息，通过C6/36细胞连续传代培养，成功分离出新的HB-3蚊浓核病毒，并通过超速离心成功纯化出该病毒颗粒，病毒颗粒大小约20 nm。 本研究一方面表明病毒宏基因组分析是蚊虫中新病毒鉴定以及病毒群落研究的有效技术手段，另一方面让我们对蚊虫中的病毒多样性及蚊虫在病毒传播、进化中的作用有了更深入的认识。