多不饱和脂肪酸与脂肪酸脱氢酶基因关联性分析的哈蟆油评价研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aegon2010
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目的:测定吉林省不同时期和产地哈蟆油中PUFAs含量,并对其进行聚类分析,确定哈蟆油的最佳采收期和产区;探讨基因表达量和PUFAs含量的相关性,为其养殖和采收提供依据。
  方法:建立哈蟆油中多不饱和脂肪酸(PUFAs)含量测定的体外分析方法;采用气相色谱法测定吉林省靖宇县六个生长时期(出蛰期、产卵期、捕食期、入蛰期、散居冬眠期和群居冬眠期)和吉林省六个中国林蛙产地(安图、汪清、桦甸、靖宇、临江和蛟河)中国林蛙输卵管的总PUFAs、软脂酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、C18:ln9、C18:3n3、AA、EPA和DHA的含量进行测定;利用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)对PUFAs合成相关脂肪酸脱氢酶?6脂肪酸脱氢酶(?6-FAD)、?5脂肪酸脱氢酶(?5-FAD)、?9脂肪酸脱氢酶(?9-FAD)、n-3系脂肪酸脱氢酶的基因表达量进行测定,将得到的不同时期和产地脂肪酸含量及相关关键酶基因表达量进行单独的规律性和聚类分析,再利用SPSS软件和R语言等软件将二者结合进行相关性分析。
  结果:确定采用气相色谱法测定哈蟆油中PUFAs含量。在不同时期中,散居冬眠期时中国林蛙输卵管中各PUFAs含量最高,其次为入蛰期和群居冬眠期,最低为出蛰期、产卵期和捕食期;在不同产地中,靖宇中国林蛙输卵管中PUFAs综合含量较高,其次为产地汪清、桦甸和临江,最低为产地安图和蛟河。通过相关性分析发现C18:1n9和EPA可作为鉴别哈蟆油采集时期的一个重要指标;C18:3n3和DHA可作为哈蟆油产地鉴定的一个重要指标;?6-FAD和?5-FAD基因的表达量在哈蟆油采集时期的鉴别上具有重要参考价值;?6-FAD和?9-FAD基因的表达量在不同产地哈蟆油的鉴别上具有重要参考价值。
  结论:不同地区和不同采收期的哈蟆油中,PUFAs含量存在明显差异;PUFAs合成的关键酶基因表达量与PUFAs含量存在较强的相关性,通过以上探究可对哈蟆油进行更深入的评价研究。
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