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目的：观察“嗅三针”对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)滴鼻建立的帕金森病小鼠模型黑质内炎症因子的影响,探讨电针治疗帕金森的作用机制及作用靶点。
方法：SPF级健康雄性C57BL/6小鼠40只，将小鼠随机分为空白组、模型组、嗅三针组（XSZ）、左旋多巴组(L-DOPA)各10只。空白组小鼠两侧鼻孔滴入生理盐水，其余各组小鼠均以脂多糖滴鼻。两侧鼻孔各滴5μL，2次/d,持续滴3个月。慢滴以保证LPS/生理盐水在鼻腔内吸收，注意滴鼻时避免吸入肺中造成急性应激性损伤。嗅三针组采用电针干预，取穴:两眼中点上2mm的印堂穴和鼻孔外侧无毛和有毛交界处的迎香穴；电针：疏密波；强度：1mA；刺激时间：一组（印堂+左侧迎香）10min，二组（印堂+右侧迎香）10min，1次/d；针刺方向：向上斜刺0.3mm。L-DOPA组给予生理盐水溶解L-DOPA配成的每毫升含4mg溶液，根据体重进行腹腔注射。电针和药物干预在滴鼻造模开始同天进行，嗅三针组、L-DOPA组均为一个疗程/7d，一个疗程结束后隔2d进行下一疗程，持续进行10个疗程。模型组和空白组造模3个月，嗅三针组和L-DOPA组造模并进行干预3个月。四组于末次干预结束后进行旷场试验，记录并分析各组小鼠移动格子数和站立次数。12h后所有小鼠异氟烷气体麻醉，经多聚甲醛灌流固定后取小鼠脑部黑质。采用标志物Iba-1进行免疫组化观察小胶质细胞状态。利用蛋白印迹检测（WB）法和实时荧光定量（RT-PCR），分别测量小鼠脑部黑质区肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的表达水平。
结果：
1.各组小鼠行为学测试结果：与空白组相比，模型组小鼠移动格子数和站立次数均显著低于空白组（P＜0.01），说明造模成功；与模型组相比，嗅三针组和左旋多巴（L-DOPA）组可显著提高小鼠自主运动功能（P＜0.01），说明嗅三针和左旋多巴干预可以改善帕金森小鼠模型的运动障碍。
2.免疫组化Iba-1阳性表达表达百分比结果：与空白组相比，模型组小鼠黑质中Iba-1阳性表达百分比明显增多，差异具有统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，嗅三针组Iba-1阳性表达百分比降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组相比，L-DOPA组差异无统计学意义（P＞0.05）。
3.WB实验表明：与空白组相比，模型组小鼠黑质中TNF-α、IL-6的蛋白含量表达均显著高于空白组（P＜0.01）；与模型组相比，嗅三针组TNF-α和IL-6的蛋白含量表达均降低，差异有统计学差异（P＜0.05）；与模型组相比，左旋多巴组（L-DOPA）炎症因子TNF-α、IL-6蛋白的表达无统计学意义（P＞0.05）。
4.RT-PCR结果与空白组相比，模型组小鼠黑质中炎症因子TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达均显著增高，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；与模型组相比，嗅三针组小鼠黑质中炎症因子TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达水平均降低，差异有统计学意义(P＜0.05)；与模型组相比，左旋多巴组TNF-αmRNA的表达降低具有统计学差异(P＜0.05)，对于IL-6mRNA的表达水平，差异无统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1.“嗅三针”早期干预PD小鼠模型可以显著改善PD行为学症状；
2.“嗅三针”早期干预PD小鼠模型可以降低Iba-1在小胶质细胞中的表达；
3.“嗅三针”早期干预PD小鼠模型可以降低黒质中IL-6和TNF-a的表达。
方法：SPF级健康雄性C57BL/6小鼠40只，将小鼠随机分为空白组、模型组、嗅三针组（XSZ）、左旋多巴组(L-DOPA)各10只。空白组小鼠两侧鼻孔滴入生理盐水，其余各组小鼠均以脂多糖滴鼻。两侧鼻孔各滴5μL，2次/d,持续滴3个月。慢滴以保证LPS/生理盐水在鼻腔内吸收，注意滴鼻时避免吸入肺中造成急性应激性损伤。嗅三针组采用电针干预，取穴:两眼中点上2mm的印堂穴和鼻孔外侧无毛和有毛交界处的迎香穴；电针：疏密波；强度：1mA；刺激时间：一组（印堂+左侧迎香）10min，二组（印堂+右侧迎香）10min，1次/d；针刺方向：向上斜刺0.3mm。L-DOPA组给予生理盐水溶解L-DOPA配成的每毫升含4mg溶液，根据体重进行腹腔注射。电针和药物干预在滴鼻造模开始同天进行，嗅三针组、L-DOPA组均为一个疗程/7d，一个疗程结束后隔2d进行下一疗程，持续进行10个疗程。模型组和空白组造模3个月，嗅三针组和L-DOPA组造模并进行干预3个月。四组于末次干预结束后进行旷场试验，记录并分析各组小鼠移动格子数和站立次数。12h后所有小鼠异氟烷气体麻醉，经多聚甲醛灌流固定后取小鼠脑部黑质。采用标志物Iba-1进行免疫组化观察小胶质细胞状态。利用蛋白印迹检测（WB）法和实时荧光定量（RT-PCR），分别测量小鼠脑部黑质区肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的表达水平。
结果：
1.各组小鼠行为学测试结果：与空白组相比，模型组小鼠移动格子数和站立次数均显著低于空白组（P＜0.01），说明造模成功；与模型组相比，嗅三针组和左旋多巴（L-DOPA）组可显著提高小鼠自主运动功能（P＜0.01），说明嗅三针和左旋多巴干预可以改善帕金森小鼠模型的运动障碍。
2.免疫组化Iba-1阳性表达表达百分比结果：与空白组相比，模型组小鼠黑质中Iba-1阳性表达百分比明显增多，差异具有统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，嗅三针组Iba-1阳性表达百分比降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组相比，L-DOPA组差异无统计学意义（P＞0.05）。
3.WB实验表明：与空白组相比，模型组小鼠黑质中TNF-α、IL-6的蛋白含量表达均显著高于空白组（P＜0.01）；与模型组相比，嗅三针组TNF-α和IL-6的蛋白含量表达均降低，差异有统计学差异（P＜0.05）；与模型组相比，左旋多巴组（L-DOPA）炎症因子TNF-α、IL-6蛋白的表达无统计学意义（P＞0.05）。
4.RT-PCR结果与空白组相比，模型组小鼠黑质中炎症因子TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达均显著增高，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；与模型组相比，嗅三针组小鼠黑质中炎症因子TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达水平均降低，差异有统计学意义(P＜0.05)；与模型组相比，左旋多巴组TNF-αmRNA的表达降低具有统计学差异(P＜0.05)，对于IL-6mRNA的表达水平，差异无统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1.“嗅三针”早期干预PD小鼠模型可以显著改善PD行为学症状；
2.“嗅三针”早期干预PD小鼠模型可以降低Iba-1在小胶质细胞中的表达；
3.“嗅三针”早期干预PD小鼠模型可以降低黒质中IL-6和TNF-a的表达。