Immune-modulation of Th1, Th2, Treg and Th17 Transcriptional Factors Differing from Cytokine levels

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日本血吸虫病是中国最主要的蠕虫病。然而,目前对该疾病引起的免疫反应的仍鲜有报道。因此,更好地了解日本血吸虫引起的免疫反应将有利于疫苗的开发和肉芽肿相关免疫病理学改变的治疗。
  日本血吸虫从虫卵在肝脏中的沉积,到形成肉芽肿和最终导致肝纤维化的整个过程中均伴有相关基因表达模式的改变。基于这一特点,我们使用兔子作为实验模型,在多种表达水平上研究了 Th1、Th2、Treg 以及新近发现的 Th17 在日本血吸虫原发感染中的免疫应答情况。我们通过qPCR检测了Th1(TBX2和IRF8)、Th2(GATA3和STAT6)、Treg(FoxP3和MAFF)和Th17(RORC)的转录因子的mRNA表达水平;通过ELISA方法检测了血浆中 IFN-γ 和 TNF-α(Th1)、IL4 和 IL13(Th2)、IL10 和 TGF-β1(Treg)以及 IL17 ( Th17 )的表达水平。此外,我们还对上述 T 细胞亚型的典型细胞因子的mRNA 水平进行了检测。为了确定感染的强度,我们使用Kato-Katz法对粪便中的虫卵进行了计数。最后,我们对得到的数据进行了回归和相关分析,以确定这些数值之间是否存在相互联系。受到日本血吸虫感染的兔子被分为两个组,分别是组 1(吡喹酮治疗组)和组 2(未处理组)。上述所有检测均在三个时间点进行:感染后的第四周、第八周和第十二周。在第八周,受感染的兔子被随机分至组 1(吡喹酮治疗组)和组 2(未处理组)。所有的检测都以来自于健康兔子的样本作为阴性对照。阴性对照的样本是与其他样本在相同时间以相同的方式采集得到的。
  我们在研究中发现了一个有趣的现象,即日本血吸虫感染对大多数 T 细胞亚群的影响均会随着时间的推移而发生改变。在感染后的第四周,大多数转录因子表达增高并引起相应细胞因子的表达 (IRF8诱导IFN-γ表达、STAT6诱导IL4表达),但这些细胞因子的mRNA表达水平却没有发生改变。此外,吡喹酮治疗(组1)和未处理组(组2)血浆中的IL17蛋白浓度在感染后的第八周均有所增高。然而,这两组中IL17的mRNA表达则因感染严重程度的不同而有所差异。
  最重要的是,不同 T 细胞谱系之间的相互作用主要表现为感染早期转录因子水平的改变。例如,TBX2能够抑制GATA3的表达、STAT6能够抑制FoxP3的表达,而STAT6和 MAFF 之间则具有相互促进的作用。对 Treg 应答的调控则更为复杂:MAFF 对 FoxP3和 IL10 均具有负调控作用;此外,大多数转录因子的表达会受到感染强度的影响,但只有少数因子的表达受到 PZQ(吡喹酮)治疗的影响。TBX2、IRF8、STAT6 和 MAFF 的表达水平在感染后的第4周发生改变,而GATA3和RORC在感染后的第8周发生改变。但是,只有 TBX2 和 FoxP3 的表达能够在感染后的第 12 周被 PZQ 的治疗所影响,表现为TBX2表达的降低和FoxP3表达的进一步增高。出乎意料的是,组1中的FoxP3表达水平因 PZQ 治疗而增高,并伴随有 IL4 蛋白表达水平增高。然而,这种 Th2 主导的免疫应答只表现为细胞因子水平的增强而非转录因子水平。
  因此,本研究得出结论,在不同水平上对 T 细胞转录因子及相应细胞因子进行评估有助于更深入地理解 T 细胞介导的针对日本血吸虫感染的细胞免疫。此外,T 细胞亚群可能在不同程度上受到某些刺激和抑制因素的影响,这为治疗手段的开发和保护性和/或治疗性疫苗的改良提供了一个新的视角。
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