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目的：观察川崎病(kawasaki disease,KD)幼兔免疫性血管炎动物模型中急性期和恢复期血清8-异前列腺素F2α(8-iso-prostaglandinF2α,8-iso-PGF2α)的水平、血小板(PLT)数量变化,以及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预对上述指标的影响,结合病理改变探讨8-iso-PGF2α与KD血管炎性损害的关系,以及NAC对血管炎的保护作用。
方法：取75只刚断奶的日本大耳幼年家兔(幼兔),周龄3～4周,体重(698.94±47.33)g,随机分为:模型组、NAC组及对照组,每组25只。模型组于实验开始第1天和第14天予10％牛血清白蛋白2.5ml/kg静脉缓慢推注,诱发免疫性血管炎,第18天开始每天予生理盐水15ml/kg灌胃干预4周；NAC组实验开始第1天和第14天予10％牛血清白蛋白2.5 ml/kg静脉缓慢推注,诱发免疫性血管炎,第18天开始每天予1％NAC溶液15ml/kg(相当于NAC150mg/kg.d)灌胃干预4周；对照组于实验开始第1天和第14天予生理盐水2.5ml/kg静脉缓慢推注,第18天开始每天予生理盐水15ml/kg灌胃干预4周。干预后第7天(急性期)和第28天(恢复期)采血,用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清8-iso-PGF2α的浓度；用ADVIA2120型全自动血细胞分析仪测定血小板数量。同时于干预前一天(即实验第17天)各组随机取幼兔5只处死,干预后第7天各组随机取幼兔10只,干预后第28天取余下幼兔处死,取心脏组织行HE染色和Masson染色,光镜下观察血管的病理学改变。用计算机彩色病理图文分析系统对胶原纤维阳性面积占血管壁面积的百分比进行分析处理。
结果：⑴干预前一天(即第17天):模型组和NAC组可见小冠状动脉明显淋巴细胞浸润等改变,中冠状动脉出现轻度炎性损害,血管外膜水肿。干预后第7天(急性期):模型组心脏组织可见小冠状动脉淋巴细胞浸润减轻,而中冠状动脉炎性损伤改变加重,表现为血管壁水肿、内皮细胞坏死脱落、内皮下组织水肿、淋巴细胞浸润并出现血栓形成；NAC组较模型组冠状动脉病理损害明显减轻；两组中冠状动脉病理损害比较秩和检验平均秩次分别为39.65和21.35,差异有统计学意义(P＜0.05)。干预后第28天(恢复期):两组血管炎症细胞浸润消退,模型组血管壁可见不同程度的纤维增生；模型组和NAC组胶原纤维阳性面积占血管壁面积的百分比均数分别为:(21.43±4.28)％、(9.30±3.11)％,差异有统计学意义(P＜0.05)。对照组冠状动脉实验过程中均未见明显病理损害。⑵血清8-iso-PGF2α水平检测:干预后第7天(急性期)对照组、模型组和NAC组血清8-iso-PGF2α水平分别为(402.22±60.32)pg/ml、(804.61±76.72)pg/ml、(525.87±64.62)pg/ml。模型组血清8-iso-PGF2α水平较对照组显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血清8-iso-PGF2α水平较模型组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血清8-iso-PGF2α水平较对照组仍有增高,差异有统计学意义(P＜0.05)。干预后第28天(恢复期)对照组、模型组和NAC组血清8-iso-PGF2α水平分别为(403.96±68.09)pg/ml、(524.87α71.88)pg/ml、(420.48±75.00)pg/ml。模型组血清8-iso-PGF2α水平较对照组仍有增高,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血清8-iso-PGF2α水平仍低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组与对照组血清8-iso-PGF2α含量无统计学差异(P＞0.05)。模型组干预后第28天(恢复期)血清8-iso-PGF2α水平较干预后第7天(急性期)降低,差异有统计学意义(P＜0.05)。⑶血小板数量检测:干预后第7天(急性期)对照组、模型组和NAC组血小板数量分别为(504.20±55.51)×109/L、(893.30±92.71)×109/L、(558.00±76.65)×109/L。模型组血小板数量较对照组显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血小板数量较模型组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血小板数量较对照组仍有增高,差异有统计学意义(P＜0.05)。干预后第28天(恢复期)对照组、模型组和NAC组血小板数量分别为(501.40±54.85)×109/L、(512.10±63.92)×109/L、(504.90±63.25)×109/L。各组血小板数量无统计学差异(P＞0.05)。⑷各组干预后第7天血清8-iso-PGF2α水平和血小板数量呈正相关(r=0.766,P＜0.01)；各组干预后第28天血清8-iso-PGF2α水平和血小板数量无明显相关(r=0.261,P＞0.05)。
结论：①在KD幼兔免疫性血管炎的急性期和恢复期血清8-iso-PGF2α水平均有增高,且恢复期血清8-iso-PGF2α水平低于急性期8-iso-PGF2α水平。②抗氧化剂NAC能降低KD免疫性血管炎幼兔模型中8-iso-PGF2α和血小板的水平,并且能减轻血管炎的病理改变。
方法：取75只刚断奶的日本大耳幼年家兔(幼兔),周龄3～4周,体重(698.94±47.33)g,随机分为:模型组、NAC组及对照组,每组25只。模型组于实验开始第1天和第14天予10％牛血清白蛋白2.5ml/kg静脉缓慢推注,诱发免疫性血管炎,第18天开始每天予生理盐水15ml/kg灌胃干预4周；NAC组实验开始第1天和第14天予10％牛血清白蛋白2.5 ml/kg静脉缓慢推注,诱发免疫性血管炎,第18天开始每天予1％NAC溶液15ml/kg(相当于NAC150mg/kg.d)灌胃干预4周；对照组于实验开始第1天和第14天予生理盐水2.5ml/kg静脉缓慢推注,第18天开始每天予生理盐水15ml/kg灌胃干预4周。干预后第7天(急性期)和第28天(恢复期)采血,用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清8-iso-PGF2α的浓度；用ADVIA2120型全自动血细胞分析仪测定血小板数量。同时于干预前一天(即实验第17天)各组随机取幼兔5只处死,干预后第7天各组随机取幼兔10只,干预后第28天取余下幼兔处死,取心脏组织行HE染色和Masson染色,光镜下观察血管的病理学改变。用计算机彩色病理图文分析系统对胶原纤维阳性面积占血管壁面积的百分比进行分析处理。
结果：⑴干预前一天(即第17天):模型组和NAC组可见小冠状动脉明显淋巴细胞浸润等改变,中冠状动脉出现轻度炎性损害,血管外膜水肿。干预后第7天(急性期):模型组心脏组织可见小冠状动脉淋巴细胞浸润减轻,而中冠状动脉炎性损伤改变加重,表现为血管壁水肿、内皮细胞坏死脱落、内皮下组织水肿、淋巴细胞浸润并出现血栓形成；NAC组较模型组冠状动脉病理损害明显减轻；两组中冠状动脉病理损害比较秩和检验平均秩次分别为39.65和21.35,差异有统计学意义(P＜0.05)。干预后第28天(恢复期):两组血管炎症细胞浸润消退,模型组血管壁可见不同程度的纤维增生；模型组和NAC组胶原纤维阳性面积占血管壁面积的百分比均数分别为:(21.43±4.28)％、(9.30±3.11)％,差异有统计学意义(P＜0.05)。对照组冠状动脉实验过程中均未见明显病理损害。⑵血清8-iso-PGF2α水平检测:干预后第7天(急性期)对照组、模型组和NAC组血清8-iso-PGF2α水平分别为(402.22±60.32)pg/ml、(804.61±76.72)pg/ml、(525.87±64.62)pg/ml。模型组血清8-iso-PGF2α水平较对照组显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血清8-iso-PGF2α水平较模型组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血清8-iso-PGF2α水平较对照组仍有增高,差异有统计学意义(P＜0.05)。干预后第28天(恢复期)对照组、模型组和NAC组血清8-iso-PGF2α水平分别为(403.96±68.09)pg/ml、(524.87α71.88)pg/ml、(420.48±75.00)pg/ml。模型组血清8-iso-PGF2α水平较对照组仍有增高,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血清8-iso-PGF2α水平仍低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组与对照组血清8-iso-PGF2α含量无统计学差异(P＞0.05)。模型组干预后第28天(恢复期)血清8-iso-PGF2α水平较干预后第7天(急性期)降低,差异有统计学意义(P＜0.05)。⑶血小板数量检测:干预后第7天(急性期)对照组、模型组和NAC组血小板数量分别为(504.20±55.51)×109/L、(893.30±92.71)×109/L、(558.00±76.65)×109/L。模型组血小板数量较对照组显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血小板数量较模型组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05)；NAC组血小板数量较对照组仍有增高,差异有统计学意义(P＜0.05)。干预后第28天(恢复期)对照组、模型组和NAC组血小板数量分别为(501.40±54.85)×109/L、(512.10±63.92)×109/L、(504.90±63.25)×109/L。各组血小板数量无统计学差异(P＞0.05)。⑷各组干预后第7天血清8-iso-PGF2α水平和血小板数量呈正相关(r=0.766,P＜0.01)；各组干预后第28天血清8-iso-PGF2α水平和血小板数量无明显相关(r=0.261,P＞0.05)。
结论：①在KD幼兔免疫性血管炎的急性期和恢复期血清8-iso-PGF2α水平均有增高,且恢复期血清8-iso-PGF2α水平低于急性期8-iso-PGF2α水平。②抗氧化剂NAC能降低KD免疫性血管炎幼兔模型中8-iso-PGF2α和血小板的水平,并且能减轻血管炎的病理改变。