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第一部分慢性鼻窦炎患者细菌生物膜形态学及其临床相关性研究
目的:观察慢性鼻窦炎患者鼻黏膜表面细菌生物膜的检出率及其形态学特征,初步探讨细菌生物膜与慢性鼻窦炎的临床相关性。
方法:选取2009年7月至2010年9月期间于首都医科大学附属北京同仁医院行鼻内镜手术的42例患者。实验组为31例慢性鼻窦炎伴/不伴鼻息肉的患者,对照组为11例无鼻部症状接受经鼻手术的视神经减压、骨瘤或脑脊液鼻漏的患者。所有患者均于术中取钩突或前筛黏膜,并于扫描电镜下观察细菌生物膜。详细记录研究对象一般情况,VAS症状评分,鼻窦内镜评分、影像学评分等,分析细菌生物膜的存在与上述临床指标的关系。
结果:1.扫描电镜下,实验组31例慢性鼻窦炎患者中有20例可检出细菌生物膜；对照组11例患者中未发现细菌生物膜存在,两者比较有非常显著地差异(p<0.01)。
2.对照组中鼻黏膜表面的纤毛排列整齐。实验组中,普遍可见纤毛的排列紊乱、纤毛细胞缺失等黏膜损伤表现；并可以观察到成熟的细菌生物膜结构,即水通道、不定型基质及圆形或椭圆形小体。
3.实验组中,细菌生物膜阳性患者更容易表现出脓涕的症状,且阳性患者鼻窦内镜评分高于细菌生物膜阴性的患者,两者比较有显著性差异(p<0.05)。
结论:1.慢性鼻窦炎患者鼻腔鼻窦黏膜纤毛有不同程度的损伤；
2.慢性鼻窦炎患者鼻腔/窦黏膜表面存在处于生命周期不同阶段的细菌生物膜。
3.实验组细菌生物膜的检出率明显高于对照组,二者间差异具有统计学意义。
4.脓涕多的慢性鼻窦炎患者可能提示有细菌生物膜的存在。细菌生物膜阳性患者鼻窦内镜评分高,提示细菌生物膜的存在与疾病严重程度相关。
第二部分TLR2,TLR4,NF-κB及细胞因子在伴有细菌生物膜的慢性鼻窦炎患者鼻黏膜的表达
目的:目前认为慢性鼻窦炎的发病与细菌生物膜的形成有关,但是在细菌生物膜形成状态下,关于鼻粘膜局部免疫状态的研究很少。本实验旨在观察伴有细菌生物膜的慢性鼻窦炎患者局部黏膜TLR2,TLR4及NF-κB和细胞因子的表达情况。
方法:根据细菌生物膜的检出情况,对已进行扫描电镜观察的31个慢性鼻窦炎患者和11个对照者,将其分为细菌生物膜阳性慢性鼻窦炎组,细菌生物膜阴性慢性鼻窦炎组及对照组。于鼻内镜术中取研究对象钩突或者前筛的黏膜,分别采用实时定量PCR和免疫组化的方法在mRNA水平和蛋白水平比较上述各指标在三组中的差异,并用ELISA的方法检测鼻黏膜中TYF-a及IL-6的表达。
结果:1.慢性鼻窦炎组患者上述指标的表达均高于正常对照组,差别有统计学意义(p<0.05)。
2.细菌生物膜阳性的慢性鼻窦炎组和细菌生物膜阴性组在TLR2和NF-κB的表达上有差异,但是TLR4的表达在两组间无明显差异。
3.同时发现TNF-a及IL-6的表达在细菌生物膜阳性的患者明显增高(p<0.05)。
结论:细菌生物膜存在时可伴有TLR2,NF—κB及局部促炎因子的表达增高,提示细菌生物膜的存在可能导致局部TLR2-NF-κB信号通路的激活。