EB病毒膜抗原在昆虫细胞中的表达和纯化及质量检定

来源 :中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaccia_zhou
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将截去穿膜区的EBV膜抗原gp340/220基因约2.6kb插入昆虫核多角体病毒表达载体PVL941,与直线杆状病毒DNA一起通过Lipofectin方法共转染sf9细胞.用终末稀释法配合免疫荧光法连续筛选3次,获是纯化的Baculo-MA重组病毒,并连续扩增八代,平均滴度为7.35×10<8>pfu/ml.提取重组病毒的DNA并贮存于-80℃,是长期保存重组病毒的一种有效方法.正十六烷佐剂和完全弗氏佐剂诱导产生特异性抗体及中抗体的能力显著强于Al(OH)<,3>,而正十六烷佐剂则略逊于完全弗氏佐剂.采用中和EBV感染Raji细胞产生EA法(简称NEA法)及中和EBV转化脐血淋巴细胞法(间称NLT法)检测了免疫小鼠血清中的病毒中和抗体.NLT法检测中和抗体滴度比NTA法敏感.
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