新型器官移植免疫排斥反应模型的建立及移植免疫机制的初步探索

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目的:建立两种新型的器官移植排斥反应模型,即树鼩异种心脏移植模型以及使用套管法建立新型小鼠主动脉移植模型,并分别对这两种器官移植模型中的异种移植免疫排斥机制和慢性排斥反应机制进行初步探索。  方法:1.采用腹部异位心脏移植的方法建立树鼩到SD大鼠,SD大鼠到树鼩的异种心脏移植模型,对比树鼩与大鼠的解剖数据,分析模型的可行性,观察移植心脏的生存期及病理变化,观察模型的免疫排斥反应类型,进行免疫组化、微量淋巴毒实验、混合淋巴实验以进行机制的初步探讨。2.利用套管法将供体BALB/c小鼠的胸主动脉移植至受体C57BL/6(B6)小鼠的腹主动脉,建立小鼠主动脉移植模型,分析模型的可行性,观察免疫排斥反应类型,用流式细胞技术检测移植后不同时间点受体体内脾脏及淋巴结内CD4+及CD8+T细胞比例变化。  结果:1.成功建立树鼩异种异位心脏移植模型,并验证了模型的可行性,通过生存期和病理学观察:SD大鼠-树鼩异种心脏移植模型符合超急性排斥反应,树鼩-SD大鼠异种心脏移植模型符合急性排斥反应。免疫荧光实验证明在SD大鼠-树鼩心脏移植模型中,大鼠心脏组织间隙可见IgG、IgM抗体沉积,微小血管内皮可见大量C3补体沉积。微量淋巴毒实验证实其是补体依赖的免疫反应,树鼩与猴子的亲缘关系远于人与猴子的亲缘关系,猪与人类的亲缘关系远于猪与树鼩的亲缘关系。混合淋巴细胞实验发现大鼠脾脏细胞可以刺激树鼩脾脏细胞增殖,树鼩脾脏细胞可以刺激大鼠脾脏细胞增殖,二者免疫反应强烈。2.成功利用套管法建立新型小鼠主动脉移植模型,并验证了模型的可行性,通过病理学检测验证其符合慢性排斥反应的特征,与采用缝合法建立的小鼠主动脉移植模型的病理改变一致,流式细胞学分析提示CD8+T细胞在慢性排斥反应中可能起主要作用。  结论:树鼩与大鼠之间异种异位心脏移植模型是可行的,有希望替代大型灵长类动物应用于异种移植免疫排斥反应机制的研究;利用套管法建立的新型小鼠主动脉移植模型符合慢性排斥反应的特点,可应用于慢性排斥反应机制的探索。
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