血清磷酸化NF-H与大鼠脊髓损伤程度相关性研究

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目的:  通过动物实验初步研究血清磷酸化高分子量神经微丝蛋白(Phosphorylatedhigh-molecular-weightneurofilament,pNF-H)在脊髓损伤动物模型中的动态变化规律及与脊髓损伤程度的相关性,寻找能预测急性脊髓损伤程度的生化指标。  方法:  20只SpragueDawley大鼠,随机均分为4组:空白对照组、轻度脊髓损伤组、中度脊髓损伤组和重度脊髓损伤组。采用剪尾法采集大鼠血,行酶联免疫吸附法(ELISA)检测pNF-H水平,检测时间分别为脊髓损伤后15分钟、12小时、24小时、2天、3天、5天、7天;采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估脊髓损伤程度,评估时间点为脊髓损伤后2天、7天、14天;脊髓损伤后14天处死大鼠,采用LuxolFastBlue(LFB)染色组织切片,光镜下组织病理学观测并测定残存白质面积百分比。采用SPSS17.0软件对实验结果进行统计分析,大鼠血清pNF-H值随时间动态变化及组间差异进行重复测量设计方差分析;BBB评分、残存白质面积与pNF-H值之间行相关系数分析。  结果:  1、正常组大鼠血清pNF-H浓度为7.260±2.533pg/ml,在各个时间点上,轻度脊髓损伤组大鼠血清pNF-H浓度依次为50.231±16.278、319.521±44.104、、266.762±34.629、363.913±32.924、659.285±38.078、341.381±122.978、237.163±85.195、63.029±15.585,中度脊髓损伤组依次为61.075±4.513、353.328±30.738、335.418±23.271、545.551±52.032、768.285±32.515、376.860±67.984、326.656±53.147、70.071±9.700,重度脊髓组大鼠依次为73.601±11.415、394.748±20.491、397.723±55.400、659.430±46.329、815.019±104.804、462.921±38.294、355.462±45.424、86.101±10.560;  2、脊髓损伤组大鼠血清pNF-H值在第12小时及第3天出现两个高峰(P<0.05)。组间比较,在脊髓损伤后第15分钟、第12小时、第3天、第5天、第7天有显著性差异(P<0.05)。  3、BBB评分正常组为21.0±0.0,在个时间点上,轻度损伤组依次为1.200±0.837、9.200±1.483、11.000±1.581,中度损伤组依次为0、4.000±0.707、8.600±1.140,重度损伤组依次为0,2.000±0.707,4.000±0.451,组间比较在第7天及第14天有显著性差异(P<0.05);  4、残存白质面积百分比正常组为100%,轻度损伤组为26.68±4.05%,中度损伤组为10.98±3.96%,重度损伤组为2.66±2.02%,组间比较有统计学差异(P<0.05)。  5、脊髓损伤后第3天血清pNF-H检测水平同第14天BBB评分、第14天残存白质面积百分比的负相关性(Pearson相关系数分别为-0.987,、-0.978)。  结论:  脊髓损伤大鼠血清pNF-H浓度随时间变化存在双峰现象,分别出现于脊髓损伤后第12小时及第3天;脊髓损伤程度越重,大鼠pNF-H检测值越高;血清pNF-H同BBB评分、残存白质面积百分比均存在负性相关。
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