【摘 要】
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番茄,作为有着重要经济价值的蔬菜,其果实有较高的营养价值,是研究植物浆果的成熟、发育以及采后贮藏的模式作物。在拟南芥中存在一个REDUCED CHLOROPLAST COVERAGE（REC）家族,分为REC1、REC2和REC3。REC家族基因在分配叶绿体腔室大小的调控中发挥着重要的作用,例如控制细胞中所有叶绿体的空间量。另外,除了具有比野生型小的叶绿体区室外,rec突变体比野生型积累的叶绿素少
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番茄,作为有着重要经济价值的蔬菜,其果实有较高的营养价值,是研究植物浆果的成熟、发育以及采后贮藏的模式作物。在拟南芥中存在一个REDUCED CHLOROPLAST COVERAGE（REC）家族,分为REC1、REC2和REC3。REC家族基因在分配叶绿体腔室大小的调控中发挥着重要的作用,例如控制细胞中所有叶绿体的空间量。另外,除了具有比野生型小的叶绿体区室外,rec突变体比野生型积累的叶绿素少,并在其细胞内形成异常的叶绿体分布。FRIENDLY与REC基因具有一定同源性,能够促进拟南芥中线粒体的正常分布。本研究中,完成了番茄中FRIENDLY的部分直系同源基因（以下简称为SlFRIENDLY）编码蛋白的原核表达和纯化,以及与这些蛋白特异性结合的多克隆抗体的制备和亲和纯化。同时,通过观察实验室slfriendly突变体的表型特征,初步揭示了SlFRIENDLY的生物学功能,为进一步了解FRIENDLY的生物学功能打下良好的基础。具体实验结果如下:1.构建了pHIS8-3SlFRIENDLY原核表达载体,并确定了SlFRIENDLY蛋白在大肠杆菌中的最佳表达条件。2.通过Ni-NTA亲和层析和离子交换层析等方法得到了目的蛋白,并用于多克隆抗体的制备。3.初步发现纯化后的SlFRIENDLY多克隆抗体,能够在1:48000的稀释度时特异性识别SlFRIENDLY蛋白。4.slfriendly突变体番茄成熟过程中,果实颜色从橙色变为红色所需的时间延长。5.在番茄果实成熟的各个阶段,SlFRIENDLY蛋白的表达水平存在显著差异。6.呼吸作用的测定表明在果实破色之前,野生型和slfriendly突变体果实产生的二氧化碳量存在显著差异。7.储存实验表明slfriendly突变体的番茄果实可能比野生型的贮藏性更好。
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