乌药叶的成分分析与含量测定及其总黄酮提取物的研究

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乌药Lindera aggregata(Sims)Kosterm.为樟科(Lauraceae)山胡椒属(Lindera)植物,分布于江苏、浙江、台湾、福建、广东等省,以浙江省天台县较为著名,称天台乌药。其干燥块根入药,性温味辛,具有顺气止痛、温肾散寒的功效,但其叶的临床应用及药学研究较少。文献报道乌药叶可用于治疗急性蜂窝组织炎、乳房炎及臀痈,与益胃止痛方配伍可治疗慢性胃炎,然而目前对乌药叶的有效成分和生物活性都不很清楚。为充分开发乌药的药用价值,对乌药叶的化学成分进行了研究,并在此基础上建立了乌药叶质量控制的方法。此外,还开发了一种乌药叶中总黄酮提取物的制备工艺,并对总黄酮提取物的活性进行了探讨,为工业化生产和应用提供了依据。   首先,从乌药叶中分离得到9个化合物,通过理化方法和波谱技术(1H-NMR,13C-NMR),鉴定出其中的8个:槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷(LA01),山奈酚-3-O-L-鼠李糖苷(LA02),山奈酚(LA03),二氢山奈酚-3-O-L-鼠李糖苷(LA04),槲皮素(LA05),槲皮素-3-D-α-D-呋喃阿拉伯糖苷(LA06),槲皮素-3-O-α-D-吡喃葡萄糖苷(LA07),山奈酚-3-O-D-吡喃葡萄糖苷(LA08)。其中LA02、LA04、LA08均为首次从乌药中分离得到。   其次,建立了一种高效液相色谱测定乌药叶中槲皮苷含量的方法:色谱柱为Shimpack VP-ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,4.6μm),流动相为乙腈-0.5%冰醋酸(20:80),检测波长254 nm,柱温40℃,流速1 mL·min-1。结果显示,槲皮苷在1~100μg-mL-1(r=0.9999)范围内呈现良好的线性关系;槲皮苷回收率为98.38%,RSD为1.85%;样品溶液在24 h内稳定。该方法稳定快速、精密度高、重现性好,为乌药叶的质量控制提供了检测方法。   再次,研究了一种制备乌药叶总黄酮提取物的工艺,其方法为:将药材粉碎,加水煎煮提取,滤渣取液,提取液过大孔树脂柱,60%乙醇水溶液洗脱,洗脱液浓缩蒸干,即得含总黄酮的浸膏,浸膏中总黄酮含量达95.9%。该方法不仅提取效率高,操作简便,成本低廉,而且有利于环境的保护,适用于工业化生产。   最后,对乌药叶总黄酮(LA-flavonoids)进行了药理活性试验。结果表明,LA-flavonoids能通过清除自由基、抑制脂质过氧化产生抗氧化作用,从而保护CCl4所致小鼠急性肝损伤,其机制可能与调节抗氧化相关基因的表达有关。
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