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目的：研究系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间质干细胞(MSCs)生物学特性、染色体核型异常与否、多种细胞因子在mRNA水平的表达情况，以及MSCs在体内对造血支持的影响．探讨MSCs异常在SLE发生、发展中的作用。
方法：抽取11例SLE患者和6例正常入骨髓，Ficoll(1.077g/L)密度梯度离心，接种于含10％胎牛血清的L—DMEM完全培养液，置5％CO2、37℃、饱和湿度培养箱，2-3天换液去除非贴壁细胞，90％融合时0.25％胰酶消化传代．取P2代细胞消化后与FITC或PE标记的鼠抗人CD14、CD29、CD34、CD44、CD45、CD105、HLA—DR抗体作用，经流式细胞仪检测。对P2代细胞采用秋水仙素终止法原位收获MSCs染色体，显微镜行染色体核型分析。取P2代细胞制备单细胞悬液，通过消化计数法绘制12天MSCs生长曲线。取P2代细胞，Trizol试剂盒提取细胞总RNA，半定量RT—PCR方法在mRNA水平上检测SLE患者骨髓中白细胞介素—6(IL—6)，IL—7，IL11，巨噬细胞集落刺激因子(M—CSF)和干细胞因子(SCF)细胞因子的表达。取P2代细胞输注CTX 50mg·kg-1预处理的ICR小鼠，分为SLE患者MSCs输注组、正常人MSCs输注组，对照组(输注生理盐水)，观察正常人和SLE患者骨髓MSCs对小鼠造血支持的影响。采用SPSS11.5统计分析软件包进行数据分析计算。
结果：MSCs原代培养3～12天后，可出现单个或少量集落生长的贴壁细胞，8～37天后，集落不断扩大并形成融合单层，细胞呈长梭形，大小均一。原代培养可收获(0.5～1)×106个细胞。原代培养时间SLE为26±7.76天，正常人为17±5.64天(t=2.507，P=0.029)。倒置显微镜观察两组MSCs形态学没有显著差异．两组MSCs均表达CD29、CD44、CD105，不表达CD14、CD34、CD45，HLA—DR，纯度大于97％。两组染色体核型均为正常染色体核型。MSCs生长曲线为S形，接种3天始细胞开始增殖并进入对数生长期，8天后进入平台期。正常人对照组骨髓MSCs生长较SLE患者组活跃(P＜0.01)。两组P2代MSCs均表达IL—6，IL—7，IL11，M—CSF和SCF，但SLE患者组MSCs IL—6、IL—7表达降低(P＜0.01)．SLE患者和正常人骨髓MSCs输注经环磷酰胺预处理的ICR小鼠后，小鼠生命体征平稳，无排斥反应发生．SLE患者骨髓MSCs输注组小鼠和正常人骨髓MSCs输注组小鼠白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板恢复均快于对照组(P＜0.05)。
结论：建立SLE患者骨髓MSCs分离、培养体系．SLE患者MSCs表达CD29、CD44、CD105，而不表达CD14、CD34、CD45和HLA—DR，P2代后细胞均一性较高。SLE患者MSCs体外生长存在缺陷，在染色体核型方面无原发缺陷。SLE患者MSCs细胞因子分泌异常，可能造成SLE造血系统受损和免疫系统紊乱。SLE患者MSCs可促进小鼠早期造血恢复。为临床选择MSCs移植治疗SLE提供了依据。