【摘 要】
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为研究反义RNA对成纤维细胞胶原蛋白的调控作用,探讨基因治疗增生性瘢痕的可能性,我们将a1（Ⅰ）型前胶原基因片段反向克隆至非整合型哺乳动物表达载体Prep9的多克隆位点中,以构
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为研究反义RNA对成纤维细胞胶原蛋白的调控作用,探讨基因治疗增生性瘢痕的可能性,我们将a1（Ⅰ）型前胶原基因片段反向克隆至非整合型哺乳动物表达载体Prep9的多克隆位点中,以构建a1（Ⅰ）型前胶原基因反义RNA表达载体pREP9Ascoll,并籍脂质体lipofectamine将其导入人胚肺成纤维细胞中,运用MTT试验、电镜、3-H脯氨酸掺入法检测反义RNA表达载体对成纤维细胞的影响.该试验,我们针对a1（Ⅰ）型前胶原基因5端翻译区域位于第1个外显子与内含子之间的22bp片段,合成反义核酸寡聚核苷酸,并行硫代磷酸化修饰,以双蒸水溶解后,脂质体包裹导入细胞.结论：在瘢痕早期形成阶段,应用a1（Ⅰ）型前胶原基因反义寡聚核苷酸治疗能够有效下调I型胶原mRNA的表达,抑制I型胶原蛋白的合成.疗效与治疗的时间和剂量密切相关,治疗时间越长,剂量越大,疗效越显著.该组病人中,以50μg/100μl剂量治疗者效果最好.该组病人中,应用a1（Ⅰ）型前胶原基因反义寡聚核苷酸治疗增生性瘢痕,观察最长时间90天内无不良反应和任何毒副作用,安全性好,是治疗增生瘢痕的一个新途径.但大面积应用a1（Ⅰ）型前胶原基因反义寡聚核苷酸治疗对机体是否有影响,有待进一步观察.
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