不同产区牡丹内生菌研究

• 作 者: 邢晴晴
• 机 构: 安徽师范大学
• 出 处: 安徽师范大学
• 发表日期: 2015年期
• 关键词: 药用植物 组织培养 牡丹 内生菌 抑菌性 发酵工艺

常用中药牡丹皮（Moutan Cortex）为毛茛科（Ranunculaceae）芍药属（Paeonia）牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）的干燥根皮，主产安徽铜陵、亳州以及河南洛阳、山东菏泽，其中安徽铜陵是公认的牡丹皮道地产区。本研究在实验室前期研究的基础上，着重对非道地产区牡丹内生菌进行分离、鉴定并与道地产区牡丹内生菌种类构成进行了比较，同时测定了牡丹内生菌的抑菌性，优化了内生菌发酵工艺，探讨了内生菌对组培苗生长的影响。具体研究结果如下：　　1.从亳州、洛阳和菏泽产区牡丹根部分离到内生菌7属26种，其中内生细菌3属13种、内生真菌4属13种，优势属为芽孢杆菌属和青霉属；通过与道地产区内生菌种类构成进行比较，芽孢杆菌属、假单胞属、青霉属和镰刀属为道地与非道地产区所共有。　　2.采用滤纸片法、抑制菌丝生长速率法对内生菌进行抑菌活性研究表明：76.92％的内生菌对病原细菌有不同程度的抑菌性，内生细菌X11、X23和X27、内生真菌Z14对三种病原细菌均表现出抑菌性，内生细菌X27、X21发酵液对金黄色葡萄球菌作用产生的抑菌圈直径为16.1mm和17.3mm。对病原真菌产生抑菌作用的内生菌占总数的50％，其中内生细菌X27对西瓜枯萎病菌的抑制率、内生细菌X23对青霉和西瓜枯萎病菌的抑制率均在50％以上。内生真菌Z23对青霉的抑制率为64.7％，内生真菌Z21对黑线炭疽菌的抑制率达到72.1％。　　3.通过对一株具有抑菌活性的内生菌株进行合适的碳、氮源筛选，筛选出的碳源为可溶性淀粉、氮源为牛肉膏，采用正交实验进行发酵条件的优化，最佳抑菌发酵组合为：5％接种量、20％装液量和180r/min的转速，各因素对发酵的影响的大小顺序为接种量、转速和装液量。　　4.内生菌对凤丹种胚发芽率和组培苗生长影响的研究表明：44.4％内生优势菌和抑菌活性菌具有促生作用，经菌J3、J9发酵液处理过的种胚萌发率高于对照组，菌J8抑制了种胚的萌发。在所接种的内生菌组培苗中，菌J1促进组培苗生长且地上鲜重与地下干重均高于对照组；菌J4可以提高组培苗地下鲜重和干重。