论文部分内容阅读
领春木(Euptelea pleiosperma J.D.Hooker& Thomson)属领春木科(Eupteleaceae)领春木属(Euptelea Sieb.et Zucc)植物,被国家列为三级保护植物,对其进行研究和利用具有重要意义。本论文以领春木未成熟幼胚为外植体,通过固体与液体悬浮培养技术,探讨了不同接种量、培养基、糖浓度和植物生长调节剂等对其体细胞胚胎发生及植株再生的影响,同时对诱导的愈伤组织进行细胞组织学观察。结果表明: (1)将未成熟幼胚接种到 MS附加2,4-D(1.0 mg.L-1)、NAA(0.5 mg.L-1)的培养基上诱导愈伤组织,然后再转接到 MS附加NAA(0~0.5 mg.L-1)和6-BA(0.1~2.0mg.L-1)的不同组合培养基上诱导产生胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织转接到 MS附加 NAA0.5 mg.L-1和6-BA0.5mg.L-1分化培养基上培养,即产生不同发育时期的体细胞胚,将子叶胚接种到不含任何生长调节剂的MS0培养基上培养得到再生植株。 (2)以领春木未成熟幼胚诱导分化产生的体细胞胚为初始材料,初步建立了领春木体细胞胚悬浮培养体系。结果表明,最适的接种量为1%(鲜重);较适合的基本培养基为1/2MS;0.1%的PVP能有效抑制体细胞胚的褐化;悬浮培养条件下,6%蔗糖浓度、附加6-BA0.2 mg.L-1,NAA0.05 mg.L-1都有利于球形胚团的增殖。 (3)细胞组织学研究表明,领春木多细胞原胚发生于愈伤组织表层含淀粉颗粒的胚性愈伤细胞,淀粉的积累和分布与体细胞胚胎发生早期需要大量的能量有关。在领春木整个体细胞胚胎发生过程中有两次多糖积累高峰,表现为淀粉粒的增加。第一次是在胚性愈伤组织形成时期,为胚胎发育提供能量;第二次是在球形胚后期,为胚体的进一步发育和成熟胚萌发、植株的再生准备能量。