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甲状腺疾病为人体内分泌系统中最常见的疾病之一，由于术中冰冻甲状腺组织在镜下形态多种多样，为术中甲状腺病理诊断提出了非常艰巨的任务，为此怎样进一步提升术中甲状腺疾病的诊断准确率对外科诊断和治疗起着非常重要的作用。已经通过试验得出了一项快速的Feulgen染色法，研究术中甲状腺组织印片细胞DNA倍体在快速冰冻病理检查过程中的价值，同时研究细胞DNA倍体与细胞Ki-67、TTF-1和CK19等的表达情况和临床病理特性的联系，为甲状腺疾病的病理诊断提供客观依据，指导手术术式的选择、预后的判定，并给予理论指导。 实验过程中采用快速Feulgen染色技术，使术中冰冻甲状腺组织印片在最佳的环境中进行染色。本课题统计2014年1月-2015年6月期间中国人民解放军空军总医院病理科术中检查的549例甲状腺标本，对这549例甲状腺标本行常规冰冻切片诊断、细胞DNA倍体分析和冰冻切片联合细胞DNA倍体分析诊断。由高年资病理医生及技师随机组成两组，其中一组2名医生对术中甲状腺冰冻切片使用双盲法做出诊断;第2组技术员先把甲状腺标本印片做细胞DNA扫描处理，其他2位病理医生联合细胞DNA倍体检测的结果对冰冻切片进行阅片，同样采用双盲法，并得出联合诊断结果，得出的术中甲状腺组织冰冻诊断结果和术后甲状腺组织石蜡切片的诊断结果作对比分析。术后检查甲状腺细胞抗原Ki-67、CK19及TTF-1表达情况，并从177恶性组中随机选取30个例;372例良性组中随机选取20例，检测其BRAF V600E基因突变的情况，并整理这549例患者的临床和病理资料。 通过检测实验中Feulgen染色的各个温度值及细胞的积分光密度(IOD)值得出，当实验温度设定在60℃并且染色用时设定为5min时，细胞核DNA含量最多，得到的印片细胞染色效果佳，组织结构显示清晰、细胞核着色深、组织背景染色淡。因此本实验将上述染色条件用于快速Feulgen染色过程中。手术中送检的372例甲状腺良性病变组织，印片后进行快速Feulgen染色，使用全自动细胞DNA图像分析系统(automated cell DNA ploidy analysis system，AICM-DNA)进行检测，371例没有发现＞5C的异常细胞，诊断结果为阴性;1例出现大于5C的异常细胞，诊断结果为阳性;177例甲状腺癌组织印片后经快速Feulgen染色，AICM-DNA扫描，有172例查到数目不同的＞5C的异倍体细胞，诊断结果为阳性，5例未发现＞5C的异常细胞，诊断结果为阴性;经快速Feulgen染色的细胞DNA指数均值、＞5C细胞的百分数均值和常规Feulgen染色相比，无统计学意义(P＞0.05)。549例术中送检的甲状腺标本，单独冰冻切片诊断的准确率是97.63％，其延迟诊断率是1.64％。冰冻切片与印片细胞DNA倍体分析两者共同诊断的准确率是99.27％，延迟诊断率是0.55％。甲状腺术中冰冻切片单独诊断和联合诊断的准确率、延迟诊断率相比，无统计学意义(P＞0.05)。甲状腺组织印片DNA倍体分析检测的灵敏性与阴性预测值低于冰冻切片相比，结果具有统计学意义(P＜0.05);甲状腺组织印片细胞DNA倍体分析检测的敏感性和阴性预测值不如冰冻切片联合印片细胞DNA倍体分析，其结果具有统计学意义(P＜0.05);两者联合诊断的各项检查指标均较冰冻切片单独诊断高，但是均无显著差异(P＞0.05)。甲状腺病变组织类型中，甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿的DI均值无统计学意义，其余组间＞5C的异倍体细胞的百分数均值、DI均值相比，均有统计学意义(P＜0.05)。伴随Ki-67、TTF-1表达增强，细胞DNA含量也相应增多，细胞DNA倍体含量增多，具有统计学意义(P＜0.05);分析术后甲状腺组织的临床及病理资料可知，细胞核DNA含量和病变组织类型及颈部淋巴转移情况具有相关性P＜0.05)，而细胞核DNA含量和病人的年龄及肿瘤大小没有明显相关性(P＞0.05)。 实验过程中采用的快速Feulgen染色方法其染色用时短、结果可靠、效果满意、便于操作，和常规的Feulgen染色方法比较，前者明显减少了染色耗时，适合在术中甲状腺冰冻过程AICM-DNA对细胞DNA倍体进行分析时使用。在大部分甲状腺肿物冰冻诊断时，AICM-DNA与冰冻切片的检查结果相符，它能够在术中冰冻时当作一种快捷有效的辅助检查手段。冰冻切片联合组织印片细胞DNA倍体分析检查能够增加术中甲状腺组织冰冻诊断的准确率，检查结果可靠，能为外科医生提供重要的病理诊断信息，这一技术具有推广价值。甲状腺细胞内DNA含量和病人的年龄及肿物的大小没有直接关系;细胞内DNA含量和局部淋巴结的转移情况，甲状腺疾病组织类型及细胞Ki-67的表达情况有关。甲状腺细胞Ki-67的表达越多，细胞DNA含量就越多，表明甲状腺病变恶性程度高，患者预后不良。