用双光子荧光与二次谐波技术对动脉粥样硬化组织成像的初步研究

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动脉粥样硬化(AS)是一种常见的心脑血管疾病,其病理特点是内膜增厚、胶原纤维含量增多、伴随着炎症反应、发生脂质成分的聚集,在血管内膜形成血管斑块。如果斑块发生破裂,会给患者造成生命危险。目前的检测方法多数主要是检测斑块的大小,但是决定斑块是否破裂的主要因素是斑块的类型,而不是斑块的大小。因此,研发一种可以识别斑块成分、细微结构的检查方法非常有利于动脉粥样硬化类疾病的临床早期诊断,进而进行有效的防治。   高分辨的光学显微成像技术与荧光技术结合,非常适用于组织成分的成像研究。本文采用单双光子激发荧光与双光子激发二次谐波技术结合显微成像技术,获得了动脉组织的荧光图像与二次谐波图像。对单光子激发荧光、双光子激发荧光(TPEF)对动脉血管壁的成像效果进行比较,结果证明后者比前者图像对比度高,轮廓结构清晰,图像效果好。实验获得了双光子激发成像和二次谐波成像的最佳波长,分别是800nm与880nm。在正常组织的荧光图像中,可见到丝状、绳索状的物质,从形态和光谱上猜测其为弹性蛋白,通过与染色的病理切片对比,证实了此处对应着弹性纤维成分。病态组织的光谱峰值相对于正常组织有红移现象,猜测主要是由于脂类物质的积累和增多所导致。通过对比病态组织和正常组织的光谱分布以及某特定波长下荧光强度的比值可以作为识别区分正常动脉壁和动脉粥样硬化斑块的指标。此外,实验还获得了组织的双光子二次谐波图像,在动脉组织中二次谐波效应主要由胶原蛋白产生。对比正常和病态组织的二次谐波图像强度,结合病理分析图,表明病态组织相对比正常组织胶原成分含量增多。本文的实验结果符合动脉粥样硬化病理学发展的特征,对斑块的关键组织成分成像,对斑块易损性的早期诊断,具有潜在的临床价值。
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