论文部分内容阅读
钝节拟丽藻(Nitellopsis obtuse)为轮藻科，钝节拟丽藻属植物。从目前已有的研究文献可知，轮藻植物的节间细胞为多核细胞，其细胞核广泛存在着无丝分裂(amitosis)现象。然而，大量的关于轮藻微丝骨架的研究都集中于轮藻的胞质环流、细胞器运动方面，近年来对纤毛虫的研究又显示细胞微管骨架对细胞核的无丝分裂有重要作用。而在轮藻植物中，许多重要的生理活动的正常行使都需要微丝与微管架之间协同作用。此外，至今未见有专文报道微丝骨架是否与无丝分裂有关。因而，研究将主要集中在钝节拟丽藻无丝分裂过程及微丝与无丝分裂的关系。
第一章，钝节拟丽藻细胞中无丝分裂过程及类型观察。本部分以不同生长时期钝节拟丽藻的节问细胞(长度≥1cm)、小枝细胞、苞片细胞、及假根细胞为材料，采用2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride(DAPI)荧光染色的方法，观察其细胞核无丝分裂发生的类型、过程。实验结果表明：所有细胞细胞核的分裂方式均为无丝分裂，未发现有丝分裂现象。在细胞核无丝分裂过程中，染色质不浓缩，不形成染色体，核膜不解体，核的分裂部位不定，产生的子核大小、形状各异。分裂类型多样，有横缢、劈裂和变形虫状分裂，其中横缢和劈裂占主要地位。
第二章，处于快速生长状态下的，长度为2-3cm的钝节拟丽藻小枝细胞微丝骨架与细胞核的共定位。本部分中以荧光分子探针技术与激光共聚焦扫描显微镜观察相结合，用偶联绿色荧光染料A1xea-488的鬼笔环肽(Alexa488-Phalloidin)和红色荧光染料PI(Propidium Iodide)对微丝和细胞核进行共定位标记后，在激光共聚焦扫描显微镜下扫描观察发现，处于快速生长期的小枝细胞具有两种不同的微丝骨架结构——周质微丝(Cortical actin)和亚周质微丝(Subcortical actin)。周质微丝位于质膜之下，微丝束细长，数量少，排列疏松。亚周质微丝位于周质微丝之下，微丝束粗壮，数量多，排列紧密。但二者的排列方向与于细胞生长方向一致。细胞核大多位于微丝网络下的细胞内质中，少量细胞核位于微丝网络内，外有一个与细胞核形态一致的微丝环，微丝环随着细胞核分裂过程中形态的变化而变化。为了进一步确认细胞核外微丝环的存在，将小枝细胞的细胞质挤出，在体外对其进行共定位标记，结果同样显示了微丝环的存在。
第三章使用微丝特异性解聚剂解聚处理培养中的、正快速生长的、长度为2-3cm的小枝细胞，定期取样观察、统计细胞核无丝分裂的变化情况，以探讨微丝是否影响细胞核的无丝分裂。结果显示微丝被破坏后，细胞核无丝分裂的发生受到了明显的抑制，细胞核的形态也发生了明显的变化——大多数细胞核从大而长的椭圆形细胞核转变为小而圆的卵圆形细胞核。