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近年来蓝藻水华频繁发生,其伴随产生的毒素与人类健康的关系受到了越来越多的关注。微囊藻毒素(MC)是已发现的各种不同蓝藻毒素中分布最广、危害最为严重的一类肝毒素,其通过强烈地抑制蛋白磷酸酶PP1和PP2A的活性而导致机体肝损伤。本文通过急性毒性实验,采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)测定了MC在鲫鱼和日本长耳兔中的各个组织器官分布情况,并结合前人的研究比较了MC在鱼类和哺乳动物中组织分布的差异,为评价MC的毒性提供了依据。主要结果和结论如下:
通过腹腔注射MC提取液(200和50μMC-LReq/kgbw),采用LC-MS法测定了注射后1、3、12、24、48和144h鲫鱼各组织器官中的MC含量。腹腔注射后,MC很快进入了血液循环系统并被迅速运送到鲫鱼的各个器官,表现为各组织器官不同的毒素含量水平。MC-RR在所有检测出MC的样品中占了很高的比例,而MC—LR除了在200μg/kg剂量组鲫鱼的肝脏中相对较高(11—597ng/gDW)之外,其它样品中均很低,甚至没有被检测出来,如肠、脾、脑、肾及肌肉等,MC-LR和MC-RR在鲫鱼体内的分布存在的差异可能是因为MC的器官特异性。在两个剂量组中,MC的最大含量(MC-RR+MC-LR)均出现在注射后1h的血液中,分别是3757ng/gDW(200μg/kg剂量组)和270ng/gDW(50μg/kg剂量组)。两个剂量组鲫鱼肾脏中的MC-RR含量和血液中的MC-RR含量显著付相关,表明血液对于运送MC-RR进入肾脏进一步得到排泄是很重要的。腹腔注射后鲫鱼肝重/体重比在两个剂量组均增大,50μg/kg剂量组特别明显,鲫鱼肝重/体重比增大可能是因为肝脏水肿引起的。MC在鲫鱼肝脏中清除的很快,经过48h,96.3%(200μg/kg剂量组)和85.7%(50μg/kg剂量组)累积的MC被清除。鲫鱼的心脏、性腺及脑中有不同程度的MC累积,提示MC对这些器官也可能具有毒性。
MC对日本长耳兔的急性毒性实验:通过腹腔注射MC提取液(200和50μgMC-LReq/kgbw),采用LC-MS法测定了注射后1、3、12、24和48h日本长耳兔各组织器官中的MC含量。腹腔注射50μg/kg剂量的MC提取液后约3h,超过半数的兔子死亡,说明MC对兔子的毒性很强。两个剂量组的兔子血液中检测到的MC水平均较低,仅为注射剂量的0.02%-0.40%。在50μg/kg剂量组,MC含量(MC-RR+MC-LR)在肾脏中最高(62—158ng/gDW),其次是肝脏(54—82ng/gDW),在12.5μg/kg剂量组,MC含量(MC-RR+MC—LR)在肝脏中最高(15—65ng/gDW),而且在48h与1h比显著升高(p<0.01),说明肝脏中的MC难以清除。胃肠道中也检测到相对较高的MC含量,胆、脾中的MC含量没有下降的趋势,可能是由于MC在体内的再循环引起的。肾、肺及脑中有不同程度的MC累积,提示MC对这些器官也可能具有毒性。