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花生(Arachis hypogaea L.)是我国重要的油料作物和经济作物。花生种子油脂的品质由脂肪酸的组成成分所决定。高油酸含量的花生油脂稳定性好，货架期长，而且有益于人体的健康。 △12-脂肪酸脱氢酶（delta12 fatty acid desaturase，FAD2）是植物脂肪酸合成代谢的重要酶，其作用是催化油酸在碳12和碳13位间形成双键，生成亚油酸，调控植物贮藏脂和膜脂中的油酸与亚油酸的比例。AhFAD2基因编码区序列变化引起的编码蛋白活性的差异与花生油酸、亚油酸含量具有密切的相关性。 目前通过基因工程沉默花生AhFAD2基因的方法为RNAi干扰技术，而关于基因组编辑技术修饰AhFAD2基因表达的研究较少。近年来TALENs(transcriptionactivator-like effector nucleases，TALENs)为代表的基因组编辑技术快速发展，通过TALENs基因组编辑技术定向敲除AhFAD2基因有望提高花生籽粒的油酸含量。 实验室于2013年从粤油7号叶片中克隆出AhFAD2基因（genebank登录号为:KF741365，KF741366），开放读码框（ORF）为1140bp，编码379个氨基酸，并且建立了以花生半片成熟种子为受体的非组织培养基因转化方法。 本论文对18个油酸含量不同的花生品种AhFAD2基因进行克隆，通过序列比对，分析其基因序列变化与花生油酸、与亚油酸含量的关系;同时构建花生AhFAD2基因TALENs表达载体，通过遗传转化创制AhFAD2基因花生高油酸突变体材料。实验结果表明: 1、对18个不同油酸含量花生品种的叶片AhFAD2进行克隆，利用DNAMAN软件分析AhFAD2预测氨基酸序列，结果发现，除了翻译提前终止的序列以外，AhFAD2蛋白质结构上具有3个高度保守的组氨酸结构域，分别为HECGHH，HRRHH,HVAHH。 2、利用DNAMAN软件分析18个不同油酸含量花生品种的AhFAD2基因碱基序列，高油酸花生品种在448个碱基处发生G→A突变，或442碱基处插入碱基A，或410碱基处插入碱基C，或451个碱基处发生G→T突变，或480碱基处发生碱基缺失可能会导致花生种子油酸含量的提高。 3、构建了带有35S启动子、以Bar基因为检测基因，能够识别编辑AhFAD2基因的TALENs表达载体L1-R1-PHB，L2-R2-PHB，并转化到农杆菌EHA105。经L1-R1-PHB载体感染的粤油7号花生种子数为323颗，获得拟转基因花生植株216株，对拟转基因花生植株叶片进行PCR鉴定，其中18株为阳性植株，阳性率为8.33％;经L2-R2-PHB载体感染的粤油7号花生种子数为243颗，获得拟转基因花生植株数105株，对拟转基因花生植株叶片进行PCR鉴定，其中13株为阳性植株，阳性率为12.38％。 4、随机挑取7株阳性转基因花生植株，对其AhFAD2基因TALENs靶位点序列进行PCR扩增并测序，通过DNAMAN软件分析发现，转基因植株的AhFAD2基因在TALENs靶位点处均发生碱基缺失，造成AhFAD2基因移码突变，翻译提前终止。 5、检测转基因植株第一代种子油酸与亚油酸含量发现，与非转基因植株相比，L1-R1-PHB载体转化的18株转基因植株中，种子油酸含量增加了9.54％～48.11％，亚油酸含量降低了16.75％～38.92％。经L2-R2-PHB载体转化获得的13株转基因植株中，种子油酸含量增加了15.04％～46.70％，亚油酸含量降低了14.19％～37.19％。 上述结果初步证明了AhFAD2基因碱基序列的改变（第410碱基处插入碱基C，或第451碱基处发生G→T突变，或第480碱基处发生碱基缺失）与种子油酸/亚油酸含量的变化有关，并通过TALENs基因编辑技术获得了AhFAD2基因突变材料，为进一步认识该基因对花生种子油酸含量的影响奠定了基础。