【摘 要】
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目的:通过构建新西兰大白兔尿道缺损模型,探讨胶原涂层的聚氨酯脲静电纺丝纤维支架(cc PUU)修复兔尿道缺损的可行性以及体外研究兔膀胱平滑肌细胞(BSMCs)在cc PUU支架上的生
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目的:通过构建新西兰大白兔尿道缺损模型,探讨胶原涂层的聚氨酯脲静电纺丝纤维支架(cc PUU)修复兔尿道缺损的可行性以及体外研究兔膀胱平滑肌细胞(BSMCs)在cc PUU支架上的生长情况来评估cc PUU支架材料的理化特性及生物活性。方法:(1)采用静电纺丝技术将化学聚合物聚氨酯脲制备成纤维支架;(2)应用胰蛋白酶-胶原酶酶解法从幼龄(6周龄)雄性新西兰大白兔新鲜膀胱中分离并培养膀胱平滑肌细胞,体外种植膀胱平滑肌细胞于支架材料,观察生长情况;(3)选取24只雄性新西兰大白兔,距尿道外口0.5 cm处背侧尿道后壁向近端切除尿道2.0 cm*0.8cm构建尿道缺损模型。采用随机化方法将24只雄兔分成三组:实验组即cc PUU组(n=8)使用cc PUU修复兔尿道缺损区域;对照组I即PUU组(n=8)仅应用PUU修复兔尿道缺损区域;对照组II即Control组(n=8)直接缝合兔尿道缺损区域。术后分别在第6周、12周时间点行CT尿道造影观察尿道畅通情况,然后切取包含兔尿道修复区域的尿道标本,观察并比较各组间尿道外形以及尿道狭窄、尿瘘、尿道结石等并发症发生率有无差异,以评估修复效果。结果:(1)聚氨酯脲静电纺丝纤维支架具有良好的孔隙和弹性性能。(2)兔新鲜膀胱组织分离并培养的膀胱平滑肌细胞呈长梭形,集落形成后细胞群主要呈旋涡状分布;CCK-8、细胞骨架染色和细胞活死染色实验证明cc PUU对细胞无毒性且细胞可以在支架上良好生长。(3)6周和12周CT尿道造影结果显示:cc PUU组尿道显影通畅,和术前正常尿道造影结果对比无明显差异,对照组均可观察到不同程度的尿道狭窄或尿瘘情况;观察兔尿道缺损修复区形态,可见实验组尿道壁几近完整且光滑,尿道缺损区与正常组织相互融合,对照组有不同程度的尿道狭窄和尿瘘情况发生。cc PUU组术后尿道狭窄、尿瘘和尿道结石发生率分别为1/8、1/8和0/8,合并发生率为8.30%(2/24);PUU组尿道狭窄、尿瘘和尿道结石发生率分别为3/8、3/8和0/8,合并发生率为25.00%(6/24);Control组尿道狭窄、尿瘘和尿道结石发生率分别为8/8、4/8和0/8,合并发生率为50.00%(12/24)。结论:(1)胶原涂层的聚氨酯脲静电纺丝纤维支架具有良好的理化特性和组织相容性,是理想的组织工程支架选择。(2)胶原涂层的聚氨酯脲静电纺丝纤维支架可用于组织工程尿道重建,对一定长度的兔尿道缺损具有良好的修复效果。
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