【摘 要】
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该论文将从酶活性、蛋白水平和转录水平研究盐胁迫对豌豆V型H-ATPase的影响;鉴定豌豆胞质V库,揭示盐胁迫下V型H-ATPase活性调控的可能机制,为进一步阐明植物对外界环境信号感
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该论文将从酶活性、蛋白水平和转录水平研究盐胁迫对豌豆V型H<+>-ATPase的影响;鉴定豌豆胞质V库,揭示盐胁迫下V型H<+>-ATPase活性调控的可能机制,为进一步阐明植物对外界环境信号感知、接受、转导和反应的整个过程提供实验证据,有助于阐明植物对逆境的适应性调节机理,为筛选植物抗盐品种提供理论依据.将不同浓度NaCl胁迫处理1d和100mMNaCl处理不同时间的豌豆根通过差速离心及蔗糖密度梯度离心分离纯化液泡膜,测定V型H<+>-ATPase的ATP分解活性和质子转运活性,并用Westernblot检测蛋白含量的变化.此外,还测定了盐胁迫下体内Na<+>含量的变化.根据红甜菜、拟南芥、芸苔、陆地棉V型H<+>-ATPase的A亚基cDNA序列的同源性设计简并引物,用RT-PCR克隆了豌豆根A亚基cDNA片段.同源性分析表明该片段与上述四个物种的A亚基的cDNA序列的同源性达到80﹪以上,证明克隆出的片段是正确的.用这一片段做探针,经地高辛标记后,通过Northernblot检测豌豆V型H<+>-ATPase的A亚基在盐胁迫下的表达.提出豌豆V型H<+>-ATPase参与抗盐胁近的作用机理.
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