【摘 要】
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目的: 观察补肾活血方对膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织和低氧诱导的人滑膜细胞HIF-1α、VEGF、MMP-3表达的影响，研究滑膜血管生成促进骨关节炎发生发展的分子机制，探讨补肾活
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目的: 观察补肾活血方对膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织和低氧诱导的人滑膜细胞HIF-1α、VEGF、MMP-3表达的影响，研究滑膜血管生成促进骨关节炎发生发展的分子机制，探讨补肾活血方治疗骨关节炎的可能作用机制。 方法: 1.26只Wistar大鼠随机分为造模组（20只）和正常对照组（6只），造模组采用改良Hulth法建立大鼠膝骨关节炎模型，造模4周后随机选择2只观察造模情况;后将造模成功的18只大鼠随机分为塞来昔布组、补肾活血方组、模型组，6只/组;模型组和对照组用生理盐水灌胃，补肾活血方组和塞来昔布组分别用补肾活血方中药和塞来昔布悬浊液灌胃;4周后行腹主动脉取血，制备大鼠血清并摘取大鼠膝关节滑膜组织;Western boltting检测大鼠膝关节滑膜组织HIF-1α、VEGF、MMP-3表达，EILSA法检测大鼠血清CTX-Ⅱ、COMP表达。 2.将低氧条件下培养的人滑膜细胞随机分为三组与人正常软骨细胞共培养:塞来昔布组、补肾活血方组、模型组，常氧条件培养的人滑膜细胞与人正常软骨细胞共培养，作为对照组;将人滑膜细胞和人正常软骨细胞共培养于Transwell小室，滑膜细胞培养在下室，软骨细胞培养在上室;模型组和对照组给予不含药血清干预培养，补肾活血方组和塞来昔布组分别给予补肾活血方含药血清和塞来昔布含药血清干预培养;RT-PCR方法检测四组滑膜细胞HIF-1αmRNA、VEGF mRNA、MMP-3 mRNA和软骨细胞CTX-Ⅱ mRNA、COMP mRNA的表达情况。 结果: 1.成功建立大鼠膝骨关节炎模型;Western boltting检测结果显示，模型组滑膜组织HIF-1α、VEGF、MMP-3的表达与正常组的相比均明显增高，差异具有显著统计学意义（***P＜0.001），补肾活血方组滑膜组织HIF-1α、 VEGF、MMP-3的表达与模型组的相比均降低，差异具有统计学意义(▲P＜0.05);EILSA检测结果显示，模型组大鼠血清中的CTX-Ⅱ、COMP含量与正常组的相比均明显增高，差异具有显著统计学意义（***P＜0.001），补肾活血方组大鼠血清中的CTX-Ⅱ、COMP含量与模型组的相比均有所下降，差异具有统计学意义(▲▲P=0.004，▲P=0.006)。 2.RT-PCR检测结果显示，共培养系统模型组滑膜细胞HIF-1α、VEGF、MMP-3的表达与正常组的相比均明显增高，差异具有显著统计学意义(***P＜0.001)，补肾活血方组滑膜细胞HIF-1α、VEGF、MMP-3的表达与模型组的相比均明显降低，差异具有显著统计学意义(▲▲▲P＜0.001)。 结论: 1.补肾活血方可下调膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织HIF-1α、VEGF、MMP-3及血清CTX-Ⅱ、COMP的表达; 2.低氧诱导可使人滑膜细胞HIF-1α、VEGF、MMP-3的表达明显增高，且低氧诱导的人滑膜细胞可显著促进软骨细胞CTX-Ⅱ、COMP的表达; 3.补肾活血方可下调共培养系统滑膜细胞HIF-1α、VEGF、MMP-3及软骨细胞CTX-Ⅱ、COMP的表达; 4.补肾活血方通过下调滑膜血管生成相关因子表达抑制滑膜血管生成，减轻滑膜病变对软骨基质降解的促进作用，进而减缓骨关节炎发展，是其治疗骨关节炎的可能作用机制之一。
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