【摘 要】
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菌株选育工作在工业生物技术的发展中占有重要的一席，传统的菌株选育技术近年也得到了飞速发展，但是菌株选育的效率不高，无法满足快速发展的生物技术产业化的需求。近年来，高通量
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菌株选育工作在工业生物技术的发展中占有重要的一席，传统的菌株选育技术近年也得到了飞速发展，但是菌株选育的效率不高，无法满足快速发展的生物技术产业化的需求。近年来，高通量筛选技术发展日趋成熟，尤其国外该项技术较成熟，但现有文献报道的共同点都是对酵母菌或大肠杆菌等培养较简单的菌株进行高通量筛选，未见到有适合放线菌培养特性的高通量筛选体系。本论文基于这样的背景，尝试对放线菌(以红霉糖多孢菌为例)建立菌株的高通量筛选体系。
本论文的主要研究内容分为三大部分：一、确定合适的微孔板筛选装置，通过对不同类型的微孔板进行供氧性能实验的测试，同时对培养条件进行了筛选试验，包括摇床转速、振幅、筛选装置中的无菌介质等；二、建立生化参数高通量检测平台，主要针对菌浓、葡萄糖和化学效价三个参数建立高通量检测方法，方法的可行性运用数理统计学方法进行了鉴定；三、菌株筛选，验证高通量筛选体系的可行性：开展了经紫外诱变的菌株高产菌株的筛选及验证基因工程菌的实验。
根据以上内容，本论文最终确定48孔微孔板为筛选装置，筛选体系参数为：装液量0.9ml、摇床转速200r/min、摇床振幅25mm、无菌介质为0.22μm的微孔滤膜；在该体系下，进行紫外诱变菌株的筛选以及基因工程菌的验证工作。利用该体系成功筛选出E90(紫外诱变时间90S)，并做摇瓶验证，该菌株的化学效价较原出发生产菌株E3菌提高了50％。然而基因工程菌的验证试验表现出了不稳定性，结果虽然不尽人意，但是本论文针对基因工程改造菌mutase菌的特点，通过在其发酵前期添加琥珀酸，得到较好的实验效果，因此本论文得出结论：应针对基因工程菌的构建特点对现有筛选体系进行改造，有望将本体系应用到基因工程菌的高通量验证工作中。
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