【摘 要】
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干旱胁迫对植物生长发育造成严重的损伤。小麦作为一种主要的粮食作物,如何有效缓解其在干旱胁迫下所受损伤,是解决人们生存大计的重要课题。三唑类化合物具有植物生长调节作用
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干旱胁迫对植物生长发育造成严重的损伤。小麦作为一种主要的粮食作物,如何有效缓解其在干旱胁迫下所受损伤,是解决人们生存大计的重要课题。三唑类化合物具有植物生长调节作用,同时可有效缓解非生物胁迫等对植物体的迫害。本文通过观察己唑醇硝酸铜配合物对植物气孔和根的形态影响,以及干旱胁迫下配合物对小麦幼苗ABA含量及ABA相关基因(ABA合成关键基因9-cis-epoxycarotenoid dioxigenase(NCED)和ABA分解重要基因ABA8-hydroxylase(CYP707A1)表达的影响,探究其是否可以缓解胁迫对植物造成的损害,提高植物体的耐早性。 (1)小麦和烟草叶片下表皮组织,进行不同浓度配合物溶液和不同时间处理。0-100μM配合物处理1h,随着配合物浓度增加,烟草和小麦气孔开度逐渐减小,100μM时两者气孔开度达到最小值。设定的6个浓度(0μM、20μM、40μM、60μM、80μM、100μM)下,烟草气孔开度平均值从2.37μm减小到0.90μm。而小麦气孔开度平均值大小为:1.06μm、0.96μm、0.75μm、0.63μm、0.59μm、0.55μm。0-9h不同时间配合物处理下,烟草和小麦气孔孔径同样随着处理时间的延长,逐渐减小。烟草气孔孔径平均值在80μM配合物处理后,从-0h的2.37μm减小到9h的0.94μm。小麦经60μM配合物处理,气孔孔径相比对照依次减小40.6%(1h)、49.1%(3h)、50.9%(6h)、54.7%(9h)。己唑醇硝酸铜配合物可降低植物气孔孔径。 扫描电镜观察小麦根尖在60μ-M己唑醇硝酸铜配合物处理下的变化。对照组小麦根尖根毛稀疏、短粗。处理组小麦根尖根毛浓密、纤长。两组根尖形态学上端无明显差别,而从距根尖形态学上端5mm处开始处理组根毛相比对照组浓密、纤长。 (2)利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)方法探究己唑醇硝酸铜配合物在干旱胁迫下对小麦幼苗ABA含量和相关基因NCED和CYP707A1表达量的影响。结果显示,干旱状态下,对照组和己唑醇硝酸铜配合物处理组NCED表达量均低于未处理0h时的表达量。但在失水过程中(24-144h)对照组表达量逐渐升高,而处理组NCED表达量先降低(24-48h)后升高(96-144h);复水后(144-194h)两组表达量均下调表达。ABA分解关键基因CYP707A1表达量在整个处理过程中,相对0h时都有所增高,对照组在144h达到最高,处理组168h表达量最高。同样,对照组和处理组CYP707A1表达趋势不同,对照组表达量在干旱阶段均高于处理组,复水后却低于处理组。实验发现,CYP707A1表达量的变化大于NCED。 胁迫下,小麦幼苗叶片对照组和处理组ABA含量相对0h都升高,96h达到最大值,分别为0h的4.38倍、4.64倍。整个过程中,处理组ABA高于对照组,所以,配合物具有提高小麦幼苗干旱耐受效能。 (3)通过对CYP707A1基因表达量的检测,验证了结合PCR扩增技术及金纳米星/石墨烯/沉积纳米金复合材料制备的电化学生物传感器的测定性能。结果表明,使用生物传感器检测的上节中不同处理小麦CYP707A1基因表达量与传统的RT-qPCR结果一致。并且,该生物传感器的检测范围宽至5个数量级,最低检测可达到13pM,显示电化学生物传感器具有好的灵敏性、特异性。
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