论文部分内容阅读
目的:建立室管膜下区神经干细胞的体外培养、诱导分化及免疫鉴定体系,观察室管膜下区细胞和视网膜神经细胞共生培养后的相互影响.方法:分离并体外培养SD大鼠的室管膜下区细胞和视网膜神经细胞;提取视网膜神经细胞上清液并配制成条件分化液,利用其诱导室管膜下区细胞定向分化;采用免疫细胞化学方法,分别利用特异性抗体对分化前后的室管膜下区细胞进行鉴定;共生培养上述两种细胞,对二者的存活时间进行统计学分析并在扫描电镜下观察二者的结构变化.结果:在无血清培养基中体外培养的室管膜下区细胞能够分裂增殖,并且经免疫细胞化学法鉴定呈神经干细胞特异性巢蛋白(Nestin)阳性反应;培养于条件分化液中的室管膜下区细胞形态近似视网膜神经细胞,并且呈视网膜神经节细胞特异性抗原(Thy-1.1)阳性反应.两种细胞共生培养后体外存活时间明显延长(P<0.05),并且可见室管膜下区细胞定向分化为视网膜神经细胞样细胞.结论:室管膜下区细胞是存在于中枢神经系统中的神经干细胞,在一定条件下能够在体外增殖并且定向分化为具有视网膜神经节细胞特性的细胞.体外模拟眼内环境诱导室管膜下区细胞定向分化的成功,将为进一步的眼内移植提供依据和指导.