【摘 要】
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粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为2015年版《中华人民共和国药典》一部收载“秦艽”及常用藏药“解吉”（(分)·(套)）的基原植物之一，我国特有种，其野生资源日渐
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粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为2015年版《中华人民共和国药典》一部收载“秦艽”及常用藏药“解吉”（(分)·(套)）的基原植物之一，我国特有种，其野生资源日渐濒危。该药用植物存在与近缘种鉴定混乱、遗传背景尚不明确、道地性研究较为缺乏等问题。本课题在分布区进行系统性居群采样的基础上，对粗茎秦艽进行分类、形态、显微、化学成分、遗传结构及DNA条形码等系统的生药学研究，为其物种鉴定、品质评定、遗传学研究及保护策略的制定提供依据及参考。 具体内容: 1.对粗茎秦艽的分类学情况进行概述。 2.通过标本查阅及野外考察，采集粗茎秦艽18个居群160份，秦艽组其它9种312份及龙胆科、玄参科外类群37份，总计509份标本。 3.分别对粗茎秦艽及其近缘种粗壮秦艽、西藏秦艽主要分布区的多个居群样品进行花及花序的形态学测量，并结合数理统计分析方法，确定3个具有种间鉴定意义的稳定形态学特征。 4.对粗茎秦艽根的组织构造及8个不同居群根的粉末特征进行观察，并通过显微特征的测量进一步细化相关指标。 5.应用超高效液相联用四级杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对不同居群粗茎秦艽及外类群麻花艽根的化学成分进行组学分析。结果表明，粗茎秦艽与麻花艽之间，粗茎秦艽栽培品与野生品之间，有较明显的成分差异。 6.结合高通量及Sanger法测序技术，获得粗茎秦艽9个居群的叶绿体全基因组序列，进行基因组结构分析。通过种内比较，发现56个粗茎秦艽种内差异位点。与麻花艽、粗壮秦艽和西藏秦艽的叶绿体基因组比对，获得秦艽组种间热点变异区。 7.对粗茎秦艽11个居群33份样品的ITS区进行克隆，获得330条克隆序列，分析其单倍型及居群变异情况，初步阐明其遗传结构。 8.应用ITS、叶绿体片段序列对包括粗茎秦艽在内的10个秦艽组物种进行有效鉴定，提出各物种间DNA条形码鉴定序列及方法学参数;筛选5条叶绿体基因组片段，对8个粗茎秦艽产地居群进行有效区分鉴定。
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