论文部分内容阅读
目的：
检测中国人群原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma，POAG)患者的载脂蛋白E(apolipoprotein E，APOE)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)，并对外显子4各等位基因和基因型频率在患病组与对照组之间的差异进行统计学分析。
材料与方法：
选取2006年2月至2006年11月期间，在北京同仁医院青光眼组就诊的200例散发POAG患者和同期在北京同仁医院进行体检的200名无相关正常对照个体。在POAG患者中男性154例，女性46例；年龄范围为8-82岁，平均年龄40.32±16.80岁；高眼压性青光眼(high-tension glaucoma,HTG)患者176例，正常眼压性青光眼(normal-tension glaucoma，NTG)患者24例；青少年型开角型青光眼(juvenile-onset open angle glaucoma，JOAG)患者85例，成年型原发性开角型青光眼(adult-onset POAG)患者115例。正常对照组入选标准为年龄大于60岁，眼科检查除外眼部疾病的正常对照个体。
实验方法：
①用DNA提取试剂盒提取全基因组DNA，应用聚合酶链式反应(PCR)扩增APOE基因。PCR体系采用25μl体系，以H2O代替DNA模板作为阴性对照。PCR引物设计参考文献。
②应用直接测序法对PCR产物进行测序，应用TaqMan实时定量PCR检测方法鉴定APOE基因启动子区SNPs及外显子4的基因分型。
③统计学分析：采用X2检验和Fisher’s检验，比较POAG组、HTG组和NTG组、JOAG组和Adult-onset POAG组与正常对照组之间APOE基因各等位基因和基因型频率的分布差异，P<0.05为差异有显著性意义。
结果：
APOE基因的单独启动子多态性和外显子4分型(-491A>T，-427T>C，-290G>T和e2/e3/e4)在患病组和正常对照组之间的分布均无显著差异。
结论：
我们的研究显示APOE基因多态性在患病组和正常对照组间并无显著性差异，与已报道的其他人群研究得到的结论有所不同。POAG是一种复杂的遗传异质性疾病，多个基因和环境因素共同参与其发病，单个基因的作用是微小的。APOE基因究竟与POAG发病是否相关以及各等位基因的具体作用还需进一步的研究来验证。