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目的:
通过对IBS慢性内脏高敏感模型大鼠进行不同温度的温和灸天枢穴（双）治疗，探索温和灸作用于天枢穴温热效应特点以及艾灸的适宜温度。
方法:
出生8天的SD大鼠随机分为正常组、模型组、温和灸38℃组、温和灸42℃组、温和灸46℃组、温和灸50℃组和温和灸54℃组。除正常组外，其余各组采用乳鼠直结肠球囊扩张刺激方法制备IBS慢性内脏高敏感模型。造模结束后两周，治疗组采用温和灸双侧天枢穴，灸疗时将皮肤温度分别控制在各组预设温度，15min/次/天，连续治疗7天。治疗结束后，对所有大鼠的一般情况进行观察;腹部撤回反射评分（AWR评分）评定大鼠的内脏敏感性;HE染色观察IBS大鼠的结肠病理学变化;甲苯胺蓝改良染色法观察天枢穴局部肥大细胞数目及脱颗粒率的变化;蛋白印迹技术(westernblot)检测天枢穴皮肤内TRPV1和TRPV2蛋白表达的变化;实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测天枢穴皮肤内TRPV1mRNA和TRPV2mRNA表达的变化;激光扫描共聚焦显微技术检测肥大细胞内钙离子浓度的变化。
结果:
第一部分:①治疗前各组大鼠AWR评分比较:在相同强度的CRD刺激下，各实验组的AWR评分较正常组显著升高(P＜0.05)，各实验组相互比较的AWR评分无显著性差异。②治疗后各组大鼠AWR评分比较:在相同强度的CRD刺激下，与正常组相比，模型组、38℃及42℃温和灸组的AWR评分显著增高(P＜0.05)，46℃、50℃、54℃温和灸组的AWR评分无显著性差异;与模型组相比，各温和灸组的AWR评分有不同程度的降低，46℃、50℃、54℃温和灸组的AWR评分降低显著(P＜0.01)，38℃和42℃温和灸组的AWR评分无显著性差异。③天枢穴肥大细胞数目的变化:与正常组相比，模型组MC数目显著增加(P＜0.001)，各温和灸组天枢穴皮肤组织的MC数目无显著性差异;与模型组相比，各温和灸组的MC数目均有不同程度的降低，42℃和50℃温和灸组的MC数目降低显著(P＜0.05)。④天枢穴肥大细胞脱颗粒率的变化:与正常组相比，模型组及各温和灸组的MC脱颗粒率均显著增加(P＜0.001);与模型组相比，各温和灸组MC脱颗粒率均显著升高(P＜0.001);各温和灸组之间相互比较结果显示，MC脱颗粒率的差异均具有统计学意义(P＜0.01)，且随温度升高MC脱颗粒率相应增加。
第二部分:①大鼠天枢穴皮肤TRPV1mRNA及蛋白表达的变化:与正常组相比，模型组的表达量显著升高(P＜0.05);与模型组相比，各温和灸组的TRPV1mRNA及蛋白表达量均有不同程度的降低，46℃、50℃、54℃温和灸组的表达量降低显著(P＜0.01)，38℃和42℃温和灸组表达量的降低无统计学差异。②大鼠天枢穴皮肤TRPV2mRNA及蛋白表达的变化:与正常组相比，模型组的基因和蛋白表达量均显著升高(P＜0.05);与模型组相比，各温和灸组的TRPV2mRNA及蛋白表达量均有不同程度的降低，50℃和54℃温和灸组的基因及蛋白表达量降低显著(P＜0.05)，其余温和灸组的基因及蛋白表达无显著性变化。
第三部分:温和灸天枢穴对IBS内脏高敏感大鼠皮肤MC内Ca2+浓度的影响:与正常组相比，模型组的Ca2+浓度显著降低(P＜0.001)，与模型组相比，各温和灸组的Ca2+浓度均有显著性升高(P＜0.001)，且随温度升高MC内Ca2+浓度也有相应的升高。
结论:
1)IBS大鼠的内脏高敏感性增强，结肠黏膜完整无病理学改变。温和灸天枢穴可以显著降低大鼠的AWR评分，46℃、50℃和54℃的温和灸治疗效应明显。
2)IBS内脏高敏感大鼠天枢穴局部肥大细胞数目及脱颗粒率明显增高，温和灸可能会降低穴区局部肥大细胞的数目，能够提高MC的脱颗粒率，且随温度增高促使MC脱颗粒的现象更明显。
3)IBS内脏高敏感大鼠天枢穴局部可能存在TRPV1及TRPV2基因和蛋白的高表达，46℃、50℃和54℃的温和灸治疗能够有效下调TRPV1mRNA及蛋白表达，温和灸达到50℃和54℃时可以有效下调TRPV2mRNA及蛋白表达。
4)IBS内脏高敏感大鼠天枢穴局部肥大细胞内的Ca2+浓度明显降低，温和灸能够提高肥大细胞内的Ca2+浓度，且随温和灸温度的升高MC内Ca2+浓度也有相应的升高。46℃、50℃和54℃的温和灸治疗对于提高MC内Ca2+浓度的作用更加明显。