论文部分内容阅读
目的：了解2009年1月-2009年12月我院临床分离肠球菌对常用抗菌药物的耐药性。研究常用抗菌药物体外联合用药对肠球菌属的作用,为临床联合用药治疗肠球菌属严重感染提供实验依据。根据联合药敏试验结果,研究利奈唑胺联合米诺环素对万古霉素耐药肠球菌(VRE)的防突变浓度(MPC)及耐药机制的影响,为临床合理用药,治疗VRE引起的严重感染提供理论依据。
方法：对临床送检的407株肠球菌属菌株经鉴定,同时测量12种常用抗生素的最低抑菌浓度(MIC),选取24株肠球菌(包括14株万古霉素耐药或中介肠球菌)用肉汤微量稀释法测定左氧氟沙星+氨苄西林、万古霉素+利福平、氨苄西林+利福平、利奈唑胺+米诺环素、左氧氟沙星+利奈唑胺、氯霉素+利奈唑胺、氨苄西林+利奈唑胺、万古霉素+利奈唑胺、替考拉宁+利奈唑胺、青霉素+万古霉素、青霉素+替考拉宁、氨苄西林+万古霉素、氨苄西林+替考拉宁组合联合用药后的MIC,计算部分抑菌浓度(FIC)。选取万古霉素耐药的屎肠球菌N27、N40及标准菌株ATCC29212,琼脂平板稀释法测定单药利奈唑胺或米诺环素以及两药联用时的MPC,PCR扩增检测联用前后筛选的利奈唑胺耐药肠球菌的最常发生耐药突变的基因片段:23SrRNA基因V区2049bp-2767bp片段,并对V区产物酶切、测序鉴定突变位点和数目,检测突变产生频率、比较筛选后菌株耐药性的改变,评价利奈唑胺联合米诺环素对减少利奈唑胺耐药肠球菌产生的影响。
结果：左氧氟沙星+氨苄西林、万古霉素+利福平、氨苄西林+利福平、利奈唑胺+米诺环素等组合对肠球菌属多表现为协同或相加作用。青霉素+万古霉素、青霉素+替考拉宁、氨苄西林+万古霉素、氨苄西林+替考拉宁等组合可出现协同、相加、无关、拮抗4种结果,且是否存在协同作用与两者各自对肠球菌属的MIC值相关。左氧氟沙星+利奈唑胺、万古霉素+利奈唑胺、替考拉宁+利奈唑胺组合多表现出拮抗、无关作用。利奈唑胺联合米诺环素对30株肠球菌属联合药敏试验结果有协同、累加作用比率的分别为30％、46.7％；对于ATCC29212、N27、N40,联用前后筛选出的稳定耐药株均检测出G2576U突变,且利奈唑胺MIC值随着G2576U突变数量的增多而增高。3株菌联用米诺环素后利奈唑胺对肠球菌MPC浓度,和联用利奈唑胺后米诺环素对肠球菌MPC浓度与单药相比均有明显下降。筛选出的耐药菌株WIC值和同时联用后耐药频率也有大幅下降。
结论：左氧氟沙星+氨苄西林、万古霉素+利福平、氨苄西林+利福平、利奈唑胺+米诺环素等组合对肠球菌属多表现为协同或相加作用,可用于治疗严重肠球菌感染时的联合用药,左氧氟沙星+利奈唑胺、万古霉素+利奈唑胺、替考拉宁+利奈唑胺组合多表现出拮抗、无关作用,不建议联合治疗肠球菌感染。利奈唑胺和米诺环素单药使用更易产生耐药菌株,联合使用可降低各自单药的MPC,减少耐药突变菌的富集生长,控制感染的同时减少细菌耐药的发生发展。