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研究表明，OmpH、PtfA、PlpE和PM1665是多杀性巴氏杆菌的粘附因子，它们在本菌对宿主的感染和致病过程中发挥重要作用，但它们的致病机制尚不清楚。因此，本论文对禽多杀性巴氏杆菌P-1059株编码OmpH、PtfA、PlpE和PM1665基因进行了克隆和测序，同时对编码OmpH基因和其受体ATP合成酶β亚基基因分别进行表达和纯化。 根据已报道的禽巴氏杆菌基因组序列设计引物，用 PCR从 P-1059株基因组DNA中分别扩增出ompH、ptfA、plpE和pm1665基因，将它们分别与pMD18-T载体连接，转化大肠杆菌DH5α，经PCR和酶切鉴定重组质粒DNA后送上海生工公司测序。测序结果表明，P-1059株ompH、plpE、ptfA和pm1665基因大小分别为1032 bp、1008 bp、435 bp和348 bp。Blast分析结果显示：P-1059株ompH基因与A型巴氏杆菌CU株和D型巴氏杆菌HN-13株的同源性分别为97％和95%；P-1059株plpE基因与A:1型巴氏杆菌X-73株、A:3型巴氏杆菌P-470株、A:4型巴氏杆菌P-1662株、A:5型巴氏杆菌C48-1株和B:2型巴氏杆菌的同源性均为97%，而与D:11型巴氏杆菌ATCC12948株的同源性为94%；P-1059株ptfA基因与A:1型巴氏杆菌Pm70株的同源性为99%，而与B:2型巴氏杆菌P52株和D:1型巴氏杆菌的同源性分别为98%和95%；P-1059株 pm1665基因与 A:1型巴氏杆菌 Pm70株的同源性为99%。上述研究表明，不同血清型巴氏杆菌 ompH、plpE、ptfA和pm1665基因序列有较大的差异。 用PCR从P-1059株基因组DNA中扩增出ompH基因片段，将其连接至载体pQE-30的BamHI和SalI位点上，转化大肠杆菌M15，IPTG诱导表达目的蛋白。Western印迹结果表明，抗重组rOmpH抗体别别与重组OmpH和天然OmpH发生特异性反应。以CEF细胞总mRNA为模板，经RT-PCR扩增出编码ATP合成酶β亚基（ATP5B）基因，将其连接至pMD18-T载体，转化大肠杆菌DH5α，经PCR和双酶切鉴定的重组载体后送上海生工公司测序。用BamHI和HindIII双酶切重组载体pMD18-ATP5B，用切胶回收试剂盒纯化目的基因片段，将其克隆至表达载体pET32a的多克隆位点上，构建重组载体pET-ATP5B，转化大肠杆菌BL21，用IPTG诱导表达目的蛋白，亲和层析法纯化重组rATP5B。测序结果表明，CEF细胞ATP5B基因大小为1401bp，与已公布的原鸡 ATP5B基因序列的同源性为97%。Western印迹结果表明，抗人ATP5B抗体与纯化前后的rATP5B结合。 结论：本研究表达的重组rOmpH和rATP5B，为OmpH与其受体ATP5B的相互作用及其致病机制研究奠定基础。