论文部分内容阅读
通心方调控内皮祖细胞及蛋白分子促进缺血心肌血运重建的机制研究 目的: 1.探讨通心方对慢性心肌缺血小型猪侧枝循环的干预作用。 2.探讨通心方对冠心病患者外周血内皮祖细胞数量、功能以及临床疗效的影响。 方法: 1.选用20头巴马小型猪高脂喂养建立内皮功能不全猪模型，后开胸于冠状动脉回旋支近端置入Ameroid缩窄器，建立慢性心肌缺血模型。将实验猪随机分成治疗组和对照组，以1个月、3个月为随访时间节点。治疗组给予通心方，对照组则不给药，分别在随访时间节点抽取外周血及冠脉造影，比较其侧枝循环评分(Cohen-Rentrop)、血腊(TC、TG、LDL-C)、CRP、内皮功能(eNOs、ET-1)、血管生长因子(FGF、VEGF)等变化情况。随后处死实验动物取缺血心肌组织采用Western-blot及PCR方法检测缺血心肌组织中血管生长因子(VEGF、FGF)蛋白及基因的变化情况。 2.选取我院2015年7月-2016年11月收治的冠心病患者60例，随机分成对照组和治疗组，每组30例。对照组采用西医基础治疗加麝香保心丸，治疗组在基础治疗上加服通心方，疗程3个月。分别在治疗前后取患者外周血分离提取内皮祖细胞，培养后用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34+、VEGF-2+，CD45-并计数;采用CCK-8比色法检测细胞的增殖状态。比较两组患者治疗前后临床疗效以及外周血内皮祖细胞数量、增殖能力的变化以及内皮祖细胞数量与临床症状相关性。 结果: 1.实验研究:①侧枝循环评分:治疗3月组较对照3月组显著增高，较治疗1月组也有明显增高，P＜0.05。②血脂:TC、LDL-C治疗1月组较对照1月组治疗后明显下降，P＜0.05;治疗3月组较对照3月组治疗后显著降低，较治疗1月组治疗后也明显降低，P＜0.05。TG治疗3月组较对照3月组治疗后明显降低，较治疗1月组治疗后也明显降低，P＜0.05。③CRP治疗1月组较对照1月组治疗后下降，P＜0.05;治疗3月组较对照3月组治疗后无明显差异。④内皮功能:eNOs治疗1月组较对照1月组治疗后明显上升，ET-1则表现为显著下降，P＜0.05;eNOs治疗3月组较对照3月组明显上升，ET-1则明显下降，P＜0.05。⑤外周血中血管生长因子: FGF、VEGF治疗1月组较对照1月组治疗后明显上升，P＜0.05;治疗3月组较对照3月组治疗后明显上升，P＜0.05;且较治疗1月组治疗后也有明显上升，P＜0.05。⑥缺血心肌组织中血管生长因子:FGF、VEGF蛋白含量及mRNA表达水平在治疗1月组较对照1月组治疗后的明显上升，P＜0.05;治疗3月组较对照3月组治疗后明显上升，且较治疗1月组也有明显上升，P＜0.05。 2.临床研究:在经过三个月治疗后，两组EPCs数量均较治疗前均上升;治疗组EPCs数量要较对照组上升更为显著，P＜0.05。在EPCs增殖能力方面，两组在治疗后OD值从第5天开始呈对数上升期，且治疗组较对照组的对数上升期更显著，P＜0.05。从患者临床症状改善来看，治疗组较对照组改善更为明显，P＜0.05。相关性分析上提示:中医症候积分与冠脉病变数呈正相关(r=0.526)，而与外周血EPCs的数量呈负相关（r=-0.546）。 结论: 1.通心方可促使冠心病小型猪侧枝循环的生长，且治疗3月较治疗1月效果更明显。其原因可能与通心方具有调节冠心病小型猪血脂，降低总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白，改善血管内皮功能，从而促进FGF、VEGF血管生长因子的增加有关。 2.通心方能刺激冠心病患者骨髓释放更多的EPCs到外周，能显著提高外周血EPCs的数量及细胞增殖能力，改善患者临床症状，其效果优于使用麝香保心丸。从中医临床症状来看，冠心病患者的中医临床症状与EPCs数量密切相关。