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阿尔茨海默病(Alzheimers Disease，AD)，是老年期痴呆最常见的类型，临床上以进行性记忆力减退和认知功能障碍为主要特征。由神经细胞外β淀粉样蛋白(Aβ)异常沉积引发的老年斑(SPs)和神经细胞内由Tau蛋白聚集形成的神经元纤维缠结(NFTs)是其特征性病理学变化。尽管Aβ和Tau蛋白的关系尚未完全明确，但越来越多的证据表明不论在体内还是在体外实验，Aβ均可引起的Tau蛋白过度磷酸化，从而导致神经元微管崩解、轴浆运输障碍、最终导致神经元凋亡，因此Aβ引起的Tau蛋白过度磷酸化被普遍认为是AD的重要的发病机制之一。Aβ可以激活各种蛋白蛋白激酶引起Tau蛋白磷酸化，周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)是重要的Tau蛋白激酶之一。p35是CDK5神经专一性的激活亚基，在钙依赖性钙蛋白酶剪切作用下，转变为p25，使CDK5过度激活。 复方中药复智散(FZS)用于老年痴呆的治疗多年，能明显提高患者认知功能。本研究应用原代皮层神经元体外培养，探讨FZS对Tau蛋白磷酸化的作用。 体外培养的皮层神经元经过7天成熟期后，应用FZS、CDK5抑制剂(Roscovitine)、钙蛋白酶抑制剂(Calpeptin)预处理24h，然后应用Aβ25-35作用于皮层神经元24h。应用MTT检测细胞活力，Hoechst33258染色检测细胞凋亡，应用免疫荧光、Western Blot观察Tau蛋白磷酸化情况，应用钙指示剂Fura-2/AM在荧光显微镜下检测细胞内钙离子(Ca2+)浓度，应用液体闪烁计数仪检测CDK5激酶活性，应用酶标仪检测钙蛋白酶的活性。 20uMAβ25-35作用于皮层神经元24h明显抑制了神经元的活力，增加了神经元的凋亡。FZS(5，10，20ug/mL)则显示了神经保护作用，对抗了Aβ25-35导致的神经毒性作用，并显示出剂量依赖型的作用。15uM Roscovitine(CDK5抑制剂)和20 uM Calpeptin(钙蛋白酶抑制剂)也同样显示出神经保护作用。Western Blot和免疫荧光显示，20ug/mL FZS在多个AD疾病发病相关的磷酸化位点(Ser396，Ser202，Thr231)抑制了Aβ25-35导致的Tau蛋白磷酸化，但对总的Tau蛋白没有影响。本研究还发现，20ug/mL FZS明显抑制了Aβ25-35导致的CDK5过度激活；抑制了细胞内钙超载，降低了钙依赖性钙蛋白酶(Calpain)的活性，从而抑制了CDK5激活亚基p35向p25转变。 FZS可能通过Ca2+/Calpain/p25/CDK5这一信号通路抑制了Ap25-35导致的皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化，从而对皮层神经元起到保护作用。