论文部分内容阅读
目的:
检测初发非急性早幼粒细胞白血病(M3)型的急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓白血病细胞中miR-196b的相对表达量,观察miR-196b高表达组与低表达组的临床特征,包括性别、年龄、初发时白细胞计数、血小板计数、血红蛋白量、FAB分型、突变基因及染色体检测情况等。比较不同miR-196b表达水平组与急性髓细胞白血病目前已知的预后因素,如高白细胞计数、遗传学风险、FLT3-ITD突变基因有无联系。以及不同miR-196b表达水平组在EFS、OS上有无差异。探索miR-196b表达水平对急性髓系白血病的预后预测价值。
方法:
(1)收集2012年1月到2016年12月在丽水市中心医院血液内科就诊(确诊)的124例年龄≥18周岁、初发的非M3型急性髓细胞白血病患者骨髓细胞标本。所有患者经骨髓细胞形态学、分子生物学、细胞遗传学及流式细胞学检测后,参照世界卫生组织(WHO2008)中造血和淋巴组织肿瘤分类标准及2011年版修订的《成人急性髓系白血病(非M3)中国诊疗指南》中细胞遗传学及分子学异常所划分的不同危险分层进行相关分型和危险分层。
(2)采用茎环实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT—PCR)技术对miRNA196b进行相对定量检测。全部初发急性髓细胞白血病患者在治疗前抽取5-8ml骨髓细胞液,制成骨髓单细胞悬液,在已加入淋巴细胞分离液的试管中,沿着管壁缓慢加入骨髓单细胞悬液,分离出骨髓单个核细胞。提取骨髓液内所有RNA,通过逆转录-聚合酶链反应,先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,采用SYBR green法进行扩增,以U6为内参,检测其骨髓细胞中miR-196b的相对定量表达水平并记录。
(3)取全部患者miR-196b相对表达量中位数为界定值,高于中位数为miR-196b高表组,低于中位数为miR-196b低表达组。观察miR-196b高表达组与低表达组的临床特征,分析两组的分子生物学特点,包括性别、年龄、OS及EFS、染色体危险分层、FLT3-ITD突变等有无差异。
(4)采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。检验水准取0.05,P<0.05为有统计学意义。比较不同miR-196b表达组间与急性髓细胞白血病目前已确立的预后因素,如年龄、高白细胞、遗传学风险、FLT3-ITD突变基因有无联系。KM法和cox回归分析miR-196b表达水平与生存之间的关系。
结果:
(1)应用qRT-PCR法对124例成人初诊非M3型急性髓细胞白血病患者的miR-196b进行检测,取所有患者相对表达值中位数为分界值,高表达组62例,低表达组62例。
(2)高表达组一般临床特点:跟低表达组比较,初诊急性髓细胞白血病高表达miR-196b组的患者,具有年龄大、白细胞计数高、血小板计数高的临床特征。同时,高表达组多好发于M5型急性髓细胞白血病,即急性单核细胞白血病。
(3)高表达组的分子生物学特点:跟低表达组比较,初诊急性髓细胞白血病高表达miR-196b组的患者,具有高频率FLT3-ITD基因突变。
(4)对生存的预测作用:单因素分析提示miR-196b高表达组3年EFS和OS均较低表达组低,同时,多因素回归分析提示miR-196b对EFS有独立预后预测作用;对OS的预后预测作用也有趋势,但是没有统计学差异。
结论:
1.非M3的初诊急性髓细胞白血病的miR-196b表达存在差异,高表达组多好发于急性单核细胞白血病(M5型AML),且患者多伴年龄大,白细胞升高的临床特点,常常带有FLT3-ITD突变基因阳性。
2.miR-196b表达水平miR-196b对急性髓细胞白血病患者EFS有独立预后预测作用,可作为AML预后判断指标之一。
检测初发非急性早幼粒细胞白血病(M3)型的急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓白血病细胞中miR-196b的相对表达量,观察miR-196b高表达组与低表达组的临床特征,包括性别、年龄、初发时白细胞计数、血小板计数、血红蛋白量、FAB分型、突变基因及染色体检测情况等。比较不同miR-196b表达水平组与急性髓细胞白血病目前已知的预后因素,如高白细胞计数、遗传学风险、FLT3-ITD突变基因有无联系。以及不同miR-196b表达水平组在EFS、OS上有无差异。探索miR-196b表达水平对急性髓系白血病的预后预测价值。
方法:
(1)收集2012年1月到2016年12月在丽水市中心医院血液内科就诊(确诊)的124例年龄≥18周岁、初发的非M3型急性髓细胞白血病患者骨髓细胞标本。所有患者经骨髓细胞形态学、分子生物学、细胞遗传学及流式细胞学检测后,参照世界卫生组织(WHO2008)中造血和淋巴组织肿瘤分类标准及2011年版修订的《成人急性髓系白血病(非M3)中国诊疗指南》中细胞遗传学及分子学异常所划分的不同危险分层进行相关分型和危险分层。
(2)采用茎环实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT—PCR)技术对miRNA196b进行相对定量检测。全部初发急性髓细胞白血病患者在治疗前抽取5-8ml骨髓细胞液,制成骨髓单细胞悬液,在已加入淋巴细胞分离液的试管中,沿着管壁缓慢加入骨髓单细胞悬液,分离出骨髓单个核细胞。提取骨髓液内所有RNA,通过逆转录-聚合酶链反应,先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,采用SYBR green法进行扩增,以U6为内参,检测其骨髓细胞中miR-196b的相对定量表达水平并记录。
(3)取全部患者miR-196b相对表达量中位数为界定值,高于中位数为miR-196b高表组,低于中位数为miR-196b低表达组。观察miR-196b高表达组与低表达组的临床特征,分析两组的分子生物学特点,包括性别、年龄、OS及EFS、染色体危险分层、FLT3-ITD突变等有无差异。
(4)采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。检验水准取0.05,P<0.05为有统计学意义。比较不同miR-196b表达组间与急性髓细胞白血病目前已确立的预后因素,如年龄、高白细胞、遗传学风险、FLT3-ITD突变基因有无联系。KM法和cox回归分析miR-196b表达水平与生存之间的关系。
结果:
(1)应用qRT-PCR法对124例成人初诊非M3型急性髓细胞白血病患者的miR-196b进行检测,取所有患者相对表达值中位数为分界值,高表达组62例,低表达组62例。
(2)高表达组一般临床特点:跟低表达组比较,初诊急性髓细胞白血病高表达miR-196b组的患者,具有年龄大、白细胞计数高、血小板计数高的临床特征。同时,高表达组多好发于M5型急性髓细胞白血病,即急性单核细胞白血病。
(3)高表达组的分子生物学特点:跟低表达组比较,初诊急性髓细胞白血病高表达miR-196b组的患者,具有高频率FLT3-ITD基因突变。
(4)对生存的预测作用:单因素分析提示miR-196b高表达组3年EFS和OS均较低表达组低,同时,多因素回归分析提示miR-196b对EFS有独立预后预测作用;对OS的预后预测作用也有趋势,但是没有统计学差异。
结论:
1.非M3的初诊急性髓细胞白血病的miR-196b表达存在差异,高表达组多好发于急性单核细胞白血病(M5型AML),且患者多伴年龄大,白细胞升高的临床特点,常常带有FLT3-ITD突变基因阳性。
2.miR-196b表达水平miR-196b对急性髓细胞白血病患者EFS有独立预后预测作用,可作为AML预后判断指标之一。