鸡蛋贮藏期间三种蛋白质结构与功能性质的变化研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seryanny
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文以鸡蛋蛋清中的卵白蛋白(ovalbumin)、溶菌酶(lysozyme)以及卵粘蛋白(ovomucin)为研究对象,以三种蛋白质的结构与功能为核心,在制备出高纯度和高活性蛋白质的基础上,研究了三种蛋白质在贮藏期间结构与功能性质的变化情况,对三种蛋白质的结构变化与全蛋清功能活性之间的相关性进行了初步探究。主要研究内容和结果如下:首先,对ovalbumin在贮藏期间的结构变化情况进行了检测。结果显示在贮藏期间ovalbumin内源荧光强度由125上升至330,推测这种现象主要是由于分子间聚集情况的发生而导致的。圆二色谱中0d的ovalbumin含有大量的α-螺旋和β-折叠结构,是属于高度有序的α+β型蛋白质,其中β-折叠含量最高,占35.3%。Ovalbumin在贮藏期间其结构的有序性下降,无序性上升,无规卷曲结构在贮藏第0d与第50d分别为20.6%与27.5%,红外光谱中显示贮藏Od的ovalbumin的无规卷曲结构含量占20.14%,而贮藏第50d无规卷曲含量上升至24.02%; ovalbumin的Trp拉曼强度由0d的0.45下降至50d的0.14;PHe强度由0.78下降至0.42;505cm-1处的二硫键强度由0.43下降至0.18;在整个贮藏期间Tyr的下降幅度最小,仅下降0.02个单位值。二硫键谱峰强度的下降说明ovalbumin的分子内二硫键发生了断裂,ovalbumin的分子结构变的松散。其次,对lysozyme在贮藏期间的结构变化情况进行了检钡(?)。Lysozyme的荧光强度在贮藏期间由52上升至723,这说明,lysozyme的三种发色氨基酸(Trp、Tyr以及PHe)的微环境极性在不断下降,推测主要是由于在贮藏期间Trp残基不断包埋于分子内部而导致的。圆二色谱结果显示贮藏0d的lysozyme也含有大量的α-螺旋和p-折叠结构,其中,α-螺旋含量最高,占34.72%。无规卷曲结构由贮藏0d的24.25%上升至贮藏50d的36.52%,说明分子无序度在不断上升。红外谱图中无规卷曲含量第0d与第50d分别为27.62%和37.27%。拉曼结果显示,lysozyme含有4对二硫键,贮藏期间可以观察到二硫键谱峰由520cm-1处逐渐向507cm-1方向移动,这说明链接lysozyme两个结构域的二硫键首先发生了断裂,其次才是lysozyme分子内部的二硫键发生断裂。第三,采用多种检测方法对ovomucin贮藏期间的结构变化进行了分析。贮藏期间ovomucin的内源荧光强度由365下降至176。表明在贮藏期间,ovomucin不断变性降解,聚合成程度降低,分子间碰撞程度增加。Ovomucin本身为聚合型分子,在贮藏期间其分子聚合度在下降,分子无序性上升,无规卷曲由26.6%上升至35.8%。Ovomucin的红外光谱结果显示ovomucin的无规卷曲含量在贮藏期间有所下降,表现为1660-1640cm-1处的谱峰面积由0d的28.36%下降至50d的26.34%。这跟其自身聚合程度在不断下降有关。与红外光谱相比,溶液状态下的ovomucin在某种程度上更能代表ovomucin在贮藏期间的改变。第四,利用ovomucin与其抗体的特异性结合,采用间接ELISA方法建立了一种快速高效的ovomucin含量检测方法。该方法用于卵粘蛋白的免疫分析,标准曲线的浓度范围是50ng/mL-1000ng/mL;抗体与鸡蛋蛋清内的其他主要杂蛋白(卵白蛋白、卵转铁蛋白、溶菌酶等)间交叉反应率均小于0.01%,说明该方法不仅灵敏度高而且特异性强,可应用于检测禽蛋蛋清内ovomucin的含量。最后,本实验对贮藏期间三种蛋白质及蛋清的乳化活性、乳化稳定性、起泡性、泡沫稳定性以及lysozyme和蛋清的溶壁活性、ovomucin和蛋清的凝胶特性进行了测定,并对其进行了双变量相关性分析。分析结果显示,蛋清的乳化活力与ovalbumin的p-折叠和ovomucin的无规卷曲结构呈极显著性相关,显著性差异P<0.01,相关系数分别为-0.936与0.919;蛋清乳化稳定性主要受lysozyme的α-螺旋和无规卷曲影响,相关系数为0.859和0.908,显著性差异P<0.05,属显著性相关;蛋清起泡能力主要与ovalbumin的β-转角有关,相关系数0.914,显著性差异P<0.05;泡沫稳定性主要与lysozyme的有序结构(α-螺旋、β-折叠和β-转角)有关,其中与β-转角为极显著性相关,显著性差异P<0.01,与α-螺旋与p-折叠为显著性相关,P<0.05;溶壁活性与凝胶特性分别与lysozyme的β-折叠和ovomucin的无规卷曲高度相关,显著性差异均小于0.01。
其他文献
数学本是一门极具魅力的学科,在小学课堂中,很多时候教师都人为的为数学添上许多热闹、华美的外衣,以至于学生沉浸于数学活动或情景中,而忽视了数学内容的本质。本文认为,数学课堂
分析了Через和Спустя两个表示时间意义的前置词,提出了上述两词有时可以互换使用,其所表示的基本含义不变.并指出二者在动词体时搭配上,修辞色彩上及语义上仍有细
工程量清单计价是工程造价制度的改革,也给施工企业带来一定的风险,针对此情况,本文简要介绍了工程量清单计价以及采用该计价所带来的风险,并对风险防范提出了措施,希望通过
英语新课标强调听、说、读、写同步提高, 尤其是“写”,它不但同其它三各环节一样,都是英语教学所要训练的重点,而且是英语应用过程中不可或缺的一环。学习英语的目的不在于死记
通过对我市文化产业发展的调查研究,分析我市文化产业发展的现状和存在的问题,指出我市要突破文化产业发展的瓶颈,必须走一条文化产业发展的创新之路,具体要做好六方面创新工
蹄病为奶牛蹄的病理变化过程,包括蹄病和蹄变形。蹄变形指蹄的形状发生改变,蹄病指蹄已发生病理变化,临床表现红肿热痛和功能障碍。蹄变形是蹄病的基础,临床表现出蹄病。
受新课改的影响,生活化教学理念被提出,并受到了小学数学教师的大力应用。对具有高逻辑性、高复杂性的数学知识来说,以生活化的手段进行讲解,能够降低学生的理解难度,同时提
要想提高高中物理课堂教学效果,教师要善于调动学生的探索积极性,而课堂提问是成功调动学生探索积极性、增强课堂上多向互动、促进学生思维能力发展的有效方式。因此,高中物
“听、说、读、写”是英语学习的四项基本内容,其中“听”排在第一位,说明课程教学模式在英语学科教学中的重要性。在我国素质教育理念实施背景下,英语学科在高中教学中的重要性
财政转移支付制度是随着分税制的实行而建立起来的,是分税制财政管理体制的一部分。完善的财政转移支付制度是以彻底的分税制为基础,并且是以明确界定政府间的财权和事权为前