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第一部分、肝脏脱细胞支架的建立与鉴定
目的：比较两种不同脱细胞方法对肝脏脱细胞支架材料的影响，为肝脏组织工程寻找合适的支架材料。
方法：采用1％SDS和l%TritonX-100溶液分别经门静脉灌注，建立大鼠肝脏脱细胞支架，并对其进行形态学检查，通过血管铸型了解血管网络情况，细胞外基质成分免疫荧光染色，胶原含量，弹力蛋白含量，氨基葡聚糖含量和肝细胞生长因子含量测定来了解细胞外基质成分保留情况，最后选出适合的支架材料。
结果：SDS和TritonX-100溶液都能去除肝脏中细胞成分，并且保留血管网络。免疫荧光染色显示两种方法对支架细胞外基质成分影响不同。两种方法处理的支架中胶原含量无差别，TritonX-100处理的支架中弹力蛋白含量，氨基葡聚糖含量和肝细胞生长因子含量分别为SDS处理支架中的3倍、4.4倍和2.9倍。
结论：SDS和TritonX-100溶液均能从肝脏中获得脱细胞支架。TritonX-100处理的支架较好的保留细胞外基质成分，有望成为组织工程肝脏备选材料。
第二部分、肝脏脱细胞支架对肝细胞生长的影响
目的：比较两种不同支架材料对肝细胞生长的影响，寻找出适于肝细胞粘附和生长的支架材料。
方法：大鼠原代肝细胞分别接种于纤连蛋白(对照组)和脱细胞支架中(实验组)，通过测定细胞活性、粘附情况以及合成代谢功能，了解不同支架对肝细胞生长的影响。
结果：体外培养结果显示，实验组肝细胞呈聚集体生长，脱细胞支架极大地促进了细胞活性与粘附率，对照组肝细胞呈早单层分散生长，细胞活性与粘附率均不如实验组。实验组白蛋白分泌、尿素合成、细胞色素P450活性及细胞色素P450相关mRNA水平均显著高于对照组。
结论：与纤连蛋白相比，脱细胞支架增加肝细胞粘附率，促进肝细胞呈聚集体生长，肝细胞代谢合成功能明显增强，脱细胞支架是构建组织工程肝脏的理想材料。
第三部分、可移植组织工程肝脏的构建及其治疗肝衰竭大鼠的实验研究
目的：体外构建拥有血液流入、流出道的可移植组织工程肝脏，将其应用于急性肝功能衰竭大鼠体内，评价其治疗效果。
方法：采用肝素固化的方法肝素化脱细胞支架血管网络，然后植入肝细胞体外培养24h，构建可移植组织工程肝脏。建立90%肝切除大鼠模型，分为可移植组织工程肝脏移植治疗组和单纯肝切组，每组各10只，观察治疗后大鼠一般情况与生化指标并绘制生存曲线。
结果：脱细胞支架血管网络经肝素固化后表现出良好的抗凝特性。移植组大鼠较肝切组大鼠存活时间明显延长，具有统计学差异(P<0.01)。肝切组大鼠术后36h全部死亡，移植组72h时仍有2只存活，且移植后60h血氨出现明显下降。
结论：本实验构建的可移植组织工程肝脏对肝衰竭大鼠具有较好的治疗效果，为肝衰竭的治疗方法提供一条新的思路。