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目的：研究Ki-67、p53、mdm2、p21WAF1/CIP1在中耳胆脂瘤上皮细胞中的表达及其相关性，探讨它们在中耳胆脂瘤中的发病机制中的作用。
方法：选取2005年6月至2008年12月在我院住院接受手术治疗的20例胆脂瘤中耳炎患者的存档石蜡包埋组织作为研究组（20耳），所选病例经临床资料和病理检查证实为后天原发性胆脂瘤中耳炎。选取8例鼓室成形患者接近鼓膜的外耳道皮肤作为对照组（8耳）。采用免疫组化SP法检测标本上皮细胞Ki-67、p53、mdm2、p21WAF1/CIP1蛋白的表达。每例观察包含上皮细胞在内的5个不重复、不重叠的400倍视野，以图象采集系统采集图象，用Image Pro Plus6．0图象分析系统计数其中的阳性细胞数及细胞总数，分别计算上皮细胞Ki-67、p53、mdm2、p21WAF/CIP1的标记指数（labeling index，LI），LI=阳性细胞数/计数细胞总数×100%。所有数据经SPSS15．0 for Windows软件进行统计分析，数据以x±s表示，两独立样本进行方差齐性检验，方差齐用t检验，P<0．05有统计学意义，比较两组上皮细胞Ki-67、p53、mdm2、p21WAF1/CIP1蛋白表达的差异；对研究组试验数据进行Pearson相关分析，研究中耳胆脂瘤上皮细胞Ki-67、p53、mdm2、p21WAF1/CIP1蛋白表达间的相关性。
结果：
1、Ki-67蛋白定位于细胞核，细胞浆内未见Ki-67蛋白的表达，细胞核被染成棕黄色者为Ki-67阳性细胞，阳性细胞核表达呈点状散在分布。中耳胆脂瘤上皮细胞Ki-67阳性细胞主要分布在上皮细胞的基底层、棘细胞层，颗粒层和角质层未见表达，上皮下结缔组织中未见Ki-67阳性细胞，胆脂瘤上皮细胞基底层未见异常细胞增殖和浸润。外耳道皮肤上皮细胞Ki-67阳性细胞局限在上皮细胞的基底层，数量较少，分布稀疏。Ki-67在中耳胆脂瘤上皮细胞标记指数（LI）为（19．2±4．5），显著高于外耳道皮肤上皮细胞LI（6．6±2．1），t=2．247，P=0．035，差异有显著性。
2、p53蛋白定位于细胞核，细胞浆内未见p53蛋白的表达，细胞核被染成棕褐色者为p53阳性细胞，阳性细胞核表达呈点状散在分布。中耳胆脂瘤上皮细胞p53阳性细胞主要分布在上皮细胞的基底层、棘细胞层，颗粒层和角质层散在表达。外耳道皮肤上皮细胞p53未见表达或极少量表达，极少量表达的p53阳性细胞散在分布于上皮细胞基底层。p53在中耳胆脂瘤上皮细胞标记指数（LI）为（16．5±4．1），显著高于外耳道皮肤上皮细胞LI（2．1±0．4），t=2．605，P=0．015，差异有显著性。
3、mdm2蛋白定位于细胞浆，细胞核内未见mdm2蛋白的表达，细胞浆被染成棕黄色者为mdm2阳性细胞。中耳胆脂瘤上皮细胞mdm2阳性细胞主要分布在胆脂瘤上皮细胞的棘细胞层、颗粒层和角质层，在基底层细胞表达较弱，染色最强的部位是颗粒层和角质层。外耳道皮肤上皮细胞mdm2未见表达或极少量表达，极少量表达的mdm2阳性细胞散在分布于上皮细胞颗粒层或角质层。mdm2蛋白在中耳胆脂瘤上皮细胞标记指数（LI）为（36．1±7．0），显著高于外耳道皮肤上皮细胞LI（1．7±0．5），t=3．325，P=0．003，差异有显著性。
4、p21WAF1/CIP1蛋白定位于细胞核，细胞核被染成棕黄色者为p21WAF1/CIP1阳性细胞，细胞浆内未看到p21WAF1/CIP1蛋白的表达。中耳胆脂瘤上皮细胞p21WAF1/CIP1阳性细胞分布于上皮的全层，以靠近基底层的棘细胞层和颗粒层显著。外耳道皮肤上皮细胞p21WAF1/CIP1未见表达或极少量表达，极少量表达的p21WAF1/CIP1阳性细胞散在分布于上皮细胞棘细胞层或颗粒层。p21WAF1/CIP1蛋白在中耳胆脂瘤上皮细胞标记指数（LI）为（26．7±7．5），显著高于外耳道皮肤上皮细胞LI（2．0±0．6），t=2．775，P=0．013，差异有显著性。
5、采用Pearson相关统计学分析，发现中耳胆脂瘤上皮细胞p53、mdm2、p21WAF1/CIP1三种蛋白表达存在两两正相关，其余指标未见相关性。
结论：
1、与正常外耳道皮肤上皮细胞比较，中耳胆脂瘤上皮细胞Ki-67表达增强；在胆脂瘤基底层细胞层未见异常增殖和浸润，提示胆脂瘤上皮细胞有显著的增殖特性，但中耳胆脂瘤仍属中耳的良性病变。
2、中耳胆脂瘤上皮细胞p53、mdm2、p21WAF1/CIP1三种蛋白表达较外耳道皮肤上皮细胞增强，提示p53、mdm2、p21WAF1/CIP1蛋白异常表达与中耳胆脂瘤发生密切相关。中耳胆脂瘤上皮细胞p53、mdm2、p21WAF1/CIP1三种蛋白表达存在两两正相关，提示p53-mdm2-p21 WAF1/CIP1通路可能参与致病因素所致的胆脂瘤上皮细胞DNA受损后机体修复调控机制。
3、中耳胆脂瘤上皮细胞中p53、mdm2在上皮细胞表达存在空间分布差异，其意义在于基底细胞层中p53高表达、mdm2低表达可能与维系上皮细胞组织学上良性行为的调控有关；颗粒层、角质层p53蛋白低表达、mdm2高表达可能与胆脂瘤上皮细胞的过度增殖、角质化上皮脱屑堆积形成有关。