【摘 要】
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目的:合成满足PET使用的细胞凋亡的分子探针18F-SFB-C2A-GST融合蛋白；并对合成的探针通过动物实验获取正常组织、器官的生理分布数据，为进行细胞凋亡PET显像提供参考数据。方法:利用回旋加速器（PETtrace GE医疗系统）使加速粒子在16.5Mev能量下轰击化学丰度>98％的高纯富氧水H2O18，通过18O（p，n）18F核反应生成含18F-；以乙基-4-三甲胺苯甲酸酯-三氟磺酸盐为
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目的:合成满足PET使用的细胞凋亡的分子探针18F-SFB-C2A-GST融合蛋白；并对合成的探针通过动物实验获取正常组织、器官的生理分布数据，为进行细胞凋亡PET显像提供参考数据。
方法:利用回旋加速器（PETtrace GE医疗系统）使加速粒子在16.5Mev能量下轰击化学丰度>98％的高纯富氧水H2O18，通过18O（p，n）18F核反应生成含18F-；以乙基-4-三甲胺苯甲酸酯-三氟磺酸盐为反应前体，运用TRACERlabFXF-N及TRACERlab FX-FDG两套PET显像药物合成模块的级联，通过亲核氟化取代、氢氧化钠水解、酯化反应“三步法”合成用于标记蛋白、多肽类的中间体N-琥珀酰亚胺-4-[18F]氟苯甲酸酯（18F-SFB）。过程概括为：第一步：利用He气流将反应生成的18F传输至阴离子交换柱Sep Pak（）Light QMA，利用K2CO3及氨基聚醚（Kryptofix2.2.2）的混合溶液将QMA柱上的18F淋洗入化学合成的反应瓶，在95℃温度下把混合液蒸发干燥，保证反应瓶无水环境。第二步：将前体乙基-4-三甲胺苯甲酸酯-三氟磺酸盐（前体溶解于无水二甲基亚砜，DMSO）加入反应瓶，密闭反应管并加热至110℃持续15分钟；冷却反应后混合液至50℃左右，然后向反应瓶中加入氢氧化钠溶液，将混合液温度再次加热到95℃左右以实现水解过程。第三步：将获得的对氟[18F]苯甲酸混合液通过四甲基氢氧化胺处理，再利用O-（N-琥珀酰亚胺）N，N，N，N-四甲基脲四氟硼酸盐在90℃温度下反应5分钟将琥珀酰亚胺基酯化取代四甲胺基进而合成N-琥珀酰亚胺-4-[18F]氟苯甲酸酯（18F-SFB）。利用HPLC对合成产物与标准品19F-SFB进行对比检验，通过比较两者在HPLC分析柱上的保留时间来确定合成的中间产物；利用二氯甲烷低沸点的化学性质去除乙腈等有毒杂质确保融合蛋白C2A-GST的安全标记，同时分别利用HPLC及γ射线薄层色谱扫描仪检测其放射化学纯度。
利用得到的18F-SFB与经2-亚氨基噻吩盐酸盐（2-IT）修饰和0.1mol/l PH值为7.4的硼酸盐缓冲液处理后的C2A-GST融合蛋白在室温下反应，将纯化的18F-SFB的PBS溶液加入已纯化C2A-GST融合蛋白，室温下反应30分钟获得18F-SFB-C2A-GST。最后通过聚丙烯酰胺凝胶柱分离纯化18F-SFB-C2A-GST。
取正常ICR小鼠36只，随机分为6组，自尾静脉注射纯化的0.1-0.2ml的生理盐水注射液3.7 MBq，于注射后5分钟、30分钟、60分钟、120分钟、240分钟分别断头处死解剖，测量心、肝、脾、胃、。肾、肺、脑、骨胳、血液、股骨、小肠等组织器官每克组织的百分注射剂量，并绘制时间——生物分布曲线；从而获得18F-SFB-C2A-GST在小鼠的正常生物分布数据；分别于注射18F-SFB-C2A-GST后5分钟、15分钟、60分钟、120分钟四个时相采集部分ICR小鼠的MicroPET。图像，分析主要器官的分布及代谢情况。
结果:利用本研究方法获得的18F-SFB与标准品19F-SFB对照，在相同的HPLC分析条件下，两者在HPLC柱上的保留时间基本吻合。标记后的重组蛋白18F-SFB-C2A-GST放射化学纯度大于95％，经HPLC分析其放射峰位与紫外色谱峰位一致，且其紫外色谱峰位与C2A-GST。紫外色谱峰位一致。合成的放射化学纯度>85％。生物分布显示18F-SFB-C2A-GST在小鼠肾组织、肝组织表现为高摄取；在脾表现为明显摄取，在肺组织早期摄取相对明显但清除较快；在心肌、骨骼、脑等组织呈现低摄取。
结论:本方法可以成功合成用于标记蛋白、多肽、抗体等生物活性分子的中间体18F-SFB。18F-SFB可以成功与C2A-GST融合蛋白鳌合，实现C2A-GST融合蛋白的正电子核素标记（分子探针合成），并可获得满意的放射化学纯度和体外稳定性。18F-SFB-C2A-GST在生物体表现为明显的组织摄取差异，主要通过肝肾代谢、清除，不能通过血脑屏障进入脑组织，将其应用于肝、肾、脑等实质组织的凋亡PET显像受到限制；应用于心肌、骨骼、肺等本底摄取低或清除速度较快的组织器官进行凋亡PET显像的前景较好。
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