【摘 要】
：
目的：观察血管紧张素-（1-7）对TGF-β1诱导幼年大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响，并探讨其是否通过cAMP/PKA通路进行介导抗纤维化作用。方法：⑴细胞分离培养与鉴定：用酶消化法分离细胞，差速贴壁法纯化获得心室肌成纤维细胞为材料，用光学显微镜和免疫细胞化学的方法鉴定细胞。⑵检测方法：WST-1比色法测定细胞增殖情况，放射免疫法测定Ⅲ型胶原前体序列（PCⅢ）的含量。⑶实验分组：根据不同药
论文部分内容阅读
目的：观察血管紧张素-（1-7）对TGF-β1诱导幼年大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响，并探讨其是否通过cAMP/PKA通路进行介导抗纤维化作用。
方法：⑴细胞分离培养与鉴定：用酶消化法分离细胞，差速贴壁法纯化获得心室肌成纤维细胞为材料，用光学显微镜和免疫细胞化学的方法鉴定细胞。⑵检测方法：WST-1比色法测定细胞增殖情况，放射免疫法测定Ⅲ型胶原前体序列（PCⅢ）的含量。⑶实验分组：根据不同药物及药物不同浓度，将实验共分四部分：①观察Ang-（1-7）对基础状态下的心肌成纤维细胞是否有影响。共分5组：不同浓度（10-9-10-6M）Ang-（1-7）组和空白对照组。②观察Ang-（1-7）对TGF-β1诱导下对心肌成纤维细胞的影响。空白对照组，TGF-β1组，不同浓度的Ang-（1-7）（10-9-10-6mol/L）+TGF-β1组。③H-89对基础状态下心肌成纤维细胞的影响。空白对照组，Ang-（1-7）组，H-89组，H-89+Ang-（1-7）组。④H-89对TGF-β1诱导下对心肌成纤维细胞的影响；分5组。空白对照组，TGF-β1组，TGF-β1组+H-89组，TGF-β1+Ang-（1-7）组，TGF-β1+Ang-（1-7）+H-89组。⑷数据处理：用SPSS13.0软件包；细胞活度OD值（吸光度）数据用均数±标准差（x±s）表示，单因数方差分析进行统计学处理，两两比较采用LSD法，检验水准为P<0.05有统计学意义。
结果：①培养的细胞经过光学显微镜和免疫细胞化学的方法鉴定为心肌成纤维细胞，纯度95%以上。②Ang-（1-7）在基础状态下呈浓度依赖性抑制心肌成纤维细胞增殖和PCⅢ的合成。Ang-（1-7）各浓度组（10-9-10-6mol/L）OD值及PCⅢ的合成明显高于空白对照组（P<0.05），OD值及Pcm的合成随浓度的增加而降低，各浓度组之间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。③Ang-（1-7）呈浓度依赖性地抑制TGF-β1的诱导心肌成纤维细胞增殖及胶原PCⅢ的合成作用。④Ang-（1-7）在cAMP/PKA通路的研究。1）PKA抑制剂H-89能阻断Ang-（1-7）对TGF-β1的抑制细胞增殖和胶原PCⅢ的合成作用，与TGF-β1+ Ang-（1-7）及空白对照组比较P<0.05，与TGF-β1组比较无明显差异（P>0.05）。⑤基础状态下，H-89能阻断Ang-（1-7）对细胞增殖和胶原PCⅢ合成抑制作用，与Ang-（1-7）组比较差异明显P<0.05，与空白组对照比较无明显差异。
结论：⑴Ang-（1-7）对基础状态下心肌成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用。⑵Ang-（1-7）对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成有抑制作用。⑶Ang-（1-7）对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成的抑制作用可能是通过cAMP/PKA通路介导的。
其他文献
一、研究背景和目的：系统性红斑狼疮是一种典型的、慢性的、可累及全身多系统的自身免疫性疾病，其临床表现复杂，严重影响患者，尤其是育龄期女性的身体健康。免疫调控失衡是SLE发病的中心环节，其主要表现为自身反应性淋巴细胞异常活化，自身抗体大量产生，循环免疫复合物异常沉积于组织和器官，导致多器官系统的损害。然而，目前SLE的确切病因和发病机制仍未完全明确，可涉及遗传、环境、感染、药物等多种因素，其中细胞凋
研究背景：人口老龄化是当今世界各国家已经或即将面临的严峻社会问题，在我国这一问题将会尤为突出。截至去年底我国60岁以上的人口已达1.44亿，占总人口的11％，已进入老龄化社会。而在未来的几十年中，我国社会老龄化的推进速度将是十分迅速：预计到2014年，我国老年人口总数将突破2亿人，2026年超过3亿人，2050年将会达到近4.5亿人，占总人口的比例超过30％。随着人口的老龄化，老年痴呆的发病率日益
研究背景及目的:肿瘤的生长与转移依赖于血管生成，在调控肿瘤血管生成的诸多因子中，血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor， VEGF)及其受体(vascularendothelial growth factor receptors，VEGFRs)在促进肿瘤血管生成中起关键作用。VEGF通过与细胞表面VEGFR的胞外区结合，激活下游信号分子，发挥促血
供应脑实质深穿支小动脉的广泛病变，或颈部大动脉及其颅内分支动脉的狭窄，导致大脑半球深部白质血流量降低，持续的低灌注状态可造成白质疏松，即缺血性白质脑病。缺血性白质脑病可以引起神经功能缺失，主要表现包括认知功能损害，是中老年血管性认知损害的主要病理类型之一。目前缺血性白质脑病的治疗方式主要是对症治疗和控制心脑血管疾病的危险因素，但治疗效果不满意，不能阻止疾病的进一步发展。因此，迫切需要探索缺血性白质
目的：探讨血管紧张素—（1—7）[Ang—（1—7）]对转化生长因—β1（TGF—β1）和结缔组织生长因子（CTGF）诱导大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）细胞增殖和细胞外基质分泌的影响。方法：将GMCs传代培养后按以下分组加入不同干预因素，Ang—（1—7）终浓度为10—6mol/L，TGF—β1终浓度为5ng/ml，CTGF为终浓度5ng/ml。①对照组：GMCs培养液中不加入干预因素；②Ang—
目的：探讨遵义地区部分妊娠期肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）与人类白细胞抗原—DQA1（human leucocyte antigen—DQA1，HLA—DQA1）等位基因多态性的关系，寻找遵义地区部分ICP患者的HLA—DQA1易感基因或保护基因，为ICP的预防及治疗提供一定的依据。方法：对研究对象抽取静脉血，提取DNA，采用聚
目的:1.观察正常人、肝硬化患者及肝细胞癌患者肝脏的31P磁共振波谱特点；2.探讨人工神经网络模型在肝细胞癌31P MRS诊断方面的优越性。方法:研究对象是25例20-80岁正常志愿者，肝硬化及肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）患者109个有效体素，中位年龄47岁，男17例，女8例。正常对照组有40个有效体素，肝硬化组26个有效体素，肝细胞癌组43个有效体素。正常
目的:合成满足PET使用的细胞凋亡的分子探针18F-SFB-C2A-GST融合蛋白；并对合成的探针通过动物实验获取正常组织、器官的生理分布数据，为进行细胞凋亡PET显像提供参考数据。方法:利用回旋加速器（PETtrace GE医疗系统）使加速粒子在16.5Mev能量下轰击化学丰度>98％的高纯富氧水H2O18，通过18O（p，n）18F核反应生成含18F-；以乙基-4-三甲胺苯甲酸酯-三氟磺酸盐为
背景及目的：在肿瘤的生长过程中，由于细胞增殖迅速，肿瘤微环境始终处于相对缺氧状态，缺氧与肿瘤细胞的生长、分化、浸润、凋亡以及转移等生物学行为密切相关。腺苷是腺嘌呤核苷酸的前体和代谢产物，在细胞氧化或应激时产生，在组织缺氧和炎症时增加。腺苷通过四种膜受体A1AR，A2aAR，A2bAR和A3AR来调节许多生理过程。其中A3腺苷受体（Adenosine A3Receptor，A3AR）在抗炎、免疫抑制