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目的
通过建立3T3-L1前脂肪细胞诱导分化模型，探讨莱藤硫烷(Su1phoraphane， SFN)对成熟脂肪细胞的凋亡诱导作用及其机制:探讨莱菔硫烷与杨梅素(Myricetin)联合应用对成熟脂肪细胞的凋亡诱导作用，为探索控制肥胖的有效途径提供科学依据。
方法
本实验采用MDI法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞，在成熟脂肪细胞的基础上观察SFN、杨梅素、SFN及杨梅素联合应用对其的影响及可能机制。MTT法检测SFN不同浓度和不同时间对成熟脂肪细胞活力的影响:采用油红O染色法，观察SFN处理24h对成熟脂肪细胞脂质含量变化的影响:Hoechst染色法观察SFN作用24h对成熟脂肪细胞凋亡的影响，以明确SFN对成熟脂肪细胞是否存在凋亡诱导作用。蛋白免疫印迹法检测SFN处理24h对成熟脂肪细胞ERK、P-ERK、Akt、P-Akt、p70S6K1、P-p70S6K1、P-Bad(Ser136)、Bax、Bcl-2、细胞色素C、caspase-3,PARP等蛋白表达的影响，揭示SFN诱导成熟脂肪细胞凋亡作用的分子机制。MTT法、油红O染色法、Hoechst染色法分别检测SFN与杨梅素联合应用对成熟脂肪细胞活力、脂质含量以及调亡的影响，初步探讨SFN与杨梅素联合应用在控制肥胖中的应用前景。
结果
本研究发现SFN可时间和剂量依赖性地抑制成熟脂肪细胞的活力、减少细胞内脂质含量并诱导细胞凋亡。蛋白免疫印迹分析发现，SFN可抑制Akt、P-Akt、p70S61、P-p70S6K1、P-Bad(Ser 136)、Bcl-2蛋白的表达水平，增加细胞色素C的水平、活化caspase-3、促进PARP的裂解，SFN处理可上调促凋亡蛋白Bax的表达，而且SFN干预明显升高ERK、P-ERK水平。另外，本研究还发现SFN与杨梅素联合应用在降低成熟脂肪细胞的活力、减少脂质含量、诱导细胞凋亡等方面，作用效果均比SFN与杨梅素单独应用明显增强。
结论
SFN可时间、剂量依赖性地降低成熟脂肪细胞的活力、诱导细胞凋亡。ERK途径和Akt/p70S6K1/Bad通路参与介导的线粒体凋亡途径在SFN诱导成熟脂肪细胞凋亡中起重要作用。SFN与杨梅素联合应用比两者单独应用的抗肥胖效果更为明显。
通过建立3T3-L1前脂肪细胞诱导分化模型，探讨莱藤硫烷(Su1phoraphane， SFN)对成熟脂肪细胞的凋亡诱导作用及其机制:探讨莱菔硫烷与杨梅素(Myricetin)联合应用对成熟脂肪细胞的凋亡诱导作用，为探索控制肥胖的有效途径提供科学依据。
方法
本实验采用MDI法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞，在成熟脂肪细胞的基础上观察SFN、杨梅素、SFN及杨梅素联合应用对其的影响及可能机制。MTT法检测SFN不同浓度和不同时间对成熟脂肪细胞活力的影响:采用油红O染色法，观察SFN处理24h对成熟脂肪细胞脂质含量变化的影响:Hoechst染色法观察SFN作用24h对成熟脂肪细胞凋亡的影响，以明确SFN对成熟脂肪细胞是否存在凋亡诱导作用。蛋白免疫印迹法检测SFN处理24h对成熟脂肪细胞ERK、P-ERK、Akt、P-Akt、p70S6K1、P-p70S6K1、P-Bad(Ser136)、Bax、Bcl-2、细胞色素C、caspase-3,PARP等蛋白表达的影响，揭示SFN诱导成熟脂肪细胞凋亡作用的分子机制。MTT法、油红O染色法、Hoechst染色法分别检测SFN与杨梅素联合应用对成熟脂肪细胞活力、脂质含量以及调亡的影响，初步探讨SFN与杨梅素联合应用在控制肥胖中的应用前景。
结果
本研究发现SFN可时间和剂量依赖性地抑制成熟脂肪细胞的活力、减少细胞内脂质含量并诱导细胞凋亡。蛋白免疫印迹分析发现，SFN可抑制Akt、P-Akt、p70S61、P-p70S6K1、P-Bad(Ser 136)、Bcl-2蛋白的表达水平，增加细胞色素C的水平、活化caspase-3、促进PARP的裂解，SFN处理可上调促凋亡蛋白Bax的表达，而且SFN干预明显升高ERK、P-ERK水平。另外，本研究还发现SFN与杨梅素联合应用在降低成熟脂肪细胞的活力、减少脂质含量、诱导细胞凋亡等方面，作用效果均比SFN与杨梅素单独应用明显增强。
结论
SFN可时间、剂量依赖性地降低成熟脂肪细胞的活力、诱导细胞凋亡。ERK途径和Akt/p70S6K1/Bad通路参与介导的线粒体凋亡途径在SFN诱导成熟脂肪细胞凋亡中起重要作用。SFN与杨梅素联合应用比两者单独应用的抗肥胖效果更为明显。