论文部分内容阅读
内生真菌的研究已有百余年的历史,但是关于其起源的问题至今仍然有不同的观点,存在两种假说,即内生说和外生说。本研究选用无菌苗及不同生长年限的铁皮石斛(Dendrobium candiudum Wall.et Lindl.)为材料,利用组织分离法从铁皮石斛的根、茎、叶中分离到108株内生真菌:无菌苗未发现内生真菌,新移栽大田的铁皮石斛分离获得11株,一年生铁皮石斛44株,两年生铁皮石斛53株,表明随着生长年限的延长,内生真菌数量越多,表明内生真菌并非植物生来就有,支持内生真菌起源的外生说。
根据菌株形态及显微结构特征,结合菌株18SrDNA和5.8SrDNA构建的系统发育树,108株内生真菌鉴定为2纲,4目,4科,11属,其中赤霉属、芽枝霉属和镰刀菌属为优势种群,分别占总菌株数的13.89％、16.67％和33.33％。内生真菌在铁皮石斛的不同部位的数量、分布和种群上存在差异,茎中最多,其次为根,叶中最少。不同生长年限铁皮石斛内生真菌的数量和种群都不相同,其中镰刀菌属存在于每一个生长期,且为优势种群。
近年来,内生真菌已成为寻找具有生物活性成分的另一重要来源。内生真菌以其丰富的生物多样性和次生代谢产物多样性,引起众多研究者的兴趣。本研究以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念球菌等为指示菌,采用滤纸片法对39株铁皮石斛内生真菌代谢产物进行抗菌活性检测。结果表明有10株菌丝体粗提物对三种指示菌中的一种或多种有抑制作用;有14株菌株发酵液对三种指示菌中的一种或多种有抑制作用。其中菌株Y-27菌丝体粗提物对白色念球菌抑制作用非常明显,平均抑菌圈直径ψ=33mm。利用HepG2.2.15细胞培养体系,以乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与乙型肝炎e抗原(HBeAg)为指标对17株菌株的菌丝体部位粗提物和12株菌株发酵液部位粗提物进行体外抗乙型肝炎病毒(HBV)活性筛选,结果表明有4株菌丝体粗提物、3株发酵液粗提物对HBsAg具有轻度抑制作用,抑制率在30％～50％之间;供试样品对HBeAg几乎都没有抑制作用。